Veselībai 1978. gada leikocītu līzes imunoloģiskie pētījumi. Netipisku un putnu mikobaktērijas izraisītu nespecifisku tuberkulīna reakciju diagnostika

Izgudrojums attiecas uz jomu laboratorijas diagnostika un to var izmantot ātrai miksomatozes diagnostikai trušiem. Metodes būtība ir tāda, ka, izmantojot pretmiksomatozes vakcīnu no B-82 celma, tiek veikta specifiska leikocītu sabrukšanas reakcija (SLLR), tiek aprēķināts RSLR indekss un diagnosticēta miksomatoze, ja tās vērtība ir 10% vai vairāk. Tehniskais rezultāts ir tādas metodes izstrāde, kas ļauj veikt paātrinātu diagnostiku agrīnā slimības stadijā, kā arī identificēt miksomatozes asimptomātisku gaitu. 1 alga faili, 2 tabulas.

Izgudrojums attiecas uz veterinārmedicīnu, jo īpaši uz ekspresijas metodēm miksomatozes diagnosticēšanai.

Ir dažādas metodes trušu miksomatozes diagnosticēšanai, tostarp antigēnu noteikšana skartajā ādā, izmantojot fluorescējošas antivielas, antivielu noteikšana, cirkulējošo imūnkompleksu noteikšana, izmantojot komplementa fiksācijas reakcijas, imūndifūzijas reakcijas, neitralizācijas reakcijas un enzīmu imūntesti (Gunenko V.V. et al. O diagnostika un profilakse par miksomatozi trušiem, Veterinary Medicine, 1987, 12. sēj., 44.-45. lpp. Zināmo metožu trūkumi ir darbietilpība, dārga aprīkojuma klātbūtne un nespēja noteikt vīrusa klātbūtni pirmajās dienās pēc inficēšanās.

Izgudrojuma mērķis ir samazināt laiku, kas nepieciešams miksomatozes izraisītāja noteikšanai dzīvnieka organismā. Noteikšana ir iespējama, sākot no trīs līdz sešām stundām pēc inficēšanās.

Šī mērķa sasniegšana ir balstīta uz imūnkompetentu asins šūnu - leikocītu - tūlītējas aktivācijas, paaugstinātas jutības un pārslodzes fenomenu, atkārtoti pakļaujot ārpus ķermeņa tā paša antigēna, kas iepriekš bija iekļuvis organismā.

Miksomatozes diagnostikas metode trušiem ir šāda. No pētāmā dzīvnieka tiek ņemts asins paraugs. Mēģenē, kurā ir 0,05 ml 3,8% nātrija citrāta šķīduma, pievieno 0,1 ml testa asiņu un antigēna darba devu - 0,05 ml sausas dzīvkultūras vakcīnas pret trušu miksomatozi no "B-82" celma. vienas imunizācijas devas atšķaidīšana uz ml fizioloģiskā šķīduma. Kontroles stobriņu iepilda tādā pašā tilpumā, bet fizioloģisko šķīdumu iepilda bez antigēna.

Caurules inkubē termostatā divas stundas +37°C temperatūrā, ik pēc 30 minūtēm kratot. Pēc tam, lai iznīcinātu sarkanās asins šūnas, 0,02 ml asiņu no kontroles un mēģenēm pārnes mēģenēs ar 0,4 ml 3% šķīduma. etiķskābe un tonēts ar genciānas violetu. Saskaitiet leikocītu skaitu abos paraugos Gorjajeva kamerā un aprēķiniet specifiskās leikocītu līzes reakcijas ātrumu (procentos), izmantojot formulu:

RSLL tiek uzskatīta par pozitīvu, ja tā ir 10% vai lielāka.

Smagas leikocitozes gadījumā, kad ir apgrūtināta leikocītu saskaitīšana, testa kontroles un eksperimentālos asins paraugus papildus atšķaida ar fizioloģisko šķīdumu attiecībā 1:1 vai 1:2.

Lai noteiktu antigēna darba devu (sausā dzīvkultūras vakcīna pret trušu miksomatozi no B-82 celma), tika atlasīti desmit veseli truši. Asinis no katra truša tika sadalītas trīs paraugos. Trīs mēģenēs pievienoja 0,1 ml testa asiņu ar 0,05 ml 3% nātrija citrāta šķīduma. Pēc tam pirmajai mēģenei pievienoja 0,05 ml antigēna - sausas dzīvas kultūras vakcīnas pret trušu miksomatozi no celma "B-82" atšķaidījumā ar četrām imunizējošām zāļu devām uz ml fizioloģiskā šķīduma, otrajā - 0,05 ml vakcīnas divu imunizācijas devu atšķaidījumā uz ml fizioloģiskā šķīduma, trešajā - 0,05 ml vakcīnas vienas imunizācijas devas atšķaidījumā uz ml fizioloģiskā šķīduma.

Caurules inkubēja divas stundas +37° temperatūrā, kratot ik pēc 30 minūtēm. Pēc tam, lai iznīcinātu sarkanās asins šūnas, 0,02 ml asiņu no kontroles un eksperimentālajām mēģenēm pārnesa mēģenēs ar 0,4 ml 3% etiķskābes šķīduma un nokrāsoja ar genciānas violetu. Tālāk mēs saskaitījām leikocītu skaitu visās mēģenēs Gorjajeva kamerā un aprēķinājām specifiskās leikocītu līzes reakcijas ātrumu (procentos), izmantojot formulu:

kur Lk un Lo ir absolūtais leikocītu skaits kontroles un eksperimentālajos paraugos.

Veseliem trušiem RSLL jābūt zem 10%. Rezultāti ir parādīti tabulā. 1.

Kā redzams no 1. tabulas, RSLL visos paraugos nepārsniedza 10%, tāpēc kā antigēna darba devu racionālāk ir ņemt vakcīnas pret trušu miksomatozi atšķaidījumu, sausu dzīvkultūru no “B-82” celms ar ātrumu viena imunizācijas deva uz ml fizioloģiskā šķīduma.

Miksomatozes retrospektīvai diagnostikai disfunkcionālā fermā tika pārbaudītas trušu asinis.

Pamatojoties uz rezultātiem klīniskais stāvoklis trušiem, tika izveidotas 4 dzīvnieku grupas pa 5 dzīvniekiem katrā (2. tabula).

Pirmā grupa - vīrusu pārnēsātāji truši ar latentu miksomatozes formu - bija saskarē ar pacientiem, taču bez klīniskām izmaiņām. Dažiem bija manāmi apmatojuma apgabali, kas liecina par miksomas mezgliņu vēsturi.

Otrajā grupā – klīniski pacienti ar miksomatozi – bija slimi truši ar plakstiņu, ausu pamatņu, anogenētiskā reģiona, muguras tūsku, ar mezglainiem ierobežotiem veidojumiem ausu, galvas un plakstiņu ādā.

Trešās grupas truši tika vakcinēti, lai noteiktu leikocītu līzes dinamiku no brīža, kad dzīvnieka organismā tika ievadīts miksomatozais antigēns, un identificētu leikocītu līzes reakcijas īpatnības vakcinētiem cilvēkiem salīdzinājumā ar vīrusa nesējiem.

Ceturtās grupas truši ir klīniski veseli un nav inficēti ar miksomatozes vīrusu, tie kalpo kā kontrole.

Specifiskās leikocītu līzes reakcijas ātrums tika noteikts visu grupu dzīvniekiem. Šim nolūkam no dzīvniekiem tika ņemti asins paraugi. Katrs paraugs tika sadalīts eksperimentālajā un kontrolē. Mēģenē, kurā bija 0,05 ml 3,8% nātrija citrāta šķīduma, tika ievietots 0,1 ml testa asiņu un antigēna darba deva - 0,05 ml sausas dzīvkultūras vakcīnas pret trušu miksomatozi no celma "B-82". pievienota vienas imunizācijas devas atšķaidījums uz ml fizioloģiskā šķīduma. Kontroles caurule tika piepildīta ar tādu pašu tilpumu, bet sāls šķīdumu bez antigēna.

Caurules inkubēja termostatā divas stundas +37°C temperatūrā, kratot ik pēc 30 minūtēm. Pēc tam, lai iznīcinātu sarkanās asins šūnas, 0,02 ml asiņu no kontroles un eksperimentālajām mēģenēm pārnesa mēģenēs ar 0,4 ml 3% etiķskābes šķīduma un nokrāsoja ar genciānas violetu. Mēs saskaitījām leikocītu skaitu abos paraugos Gorjajeva kamerā un aprēķinājām specifiskās leikocītu līzes reakcijas ātrumu (procentos), izmantojot formulu:

kur Lk un Lo ir absolūtais leikocītu skaits kontroles un eksperimentālajos paraugos.

RSLL tika uzskatīta par pozitīvu, ja rādītājs bija 10% vai augstāks.

Rezultāti ir parādīti 2. tabulā.

Kā redzams 2. tabulā, leikocītu līzes procentuālās daļas samazināšanās ātrums vakcinētiem trušiem ir 3,2 reizes lielāks nekā vīrusu pārnēsātajiem trušiem ar latentu miksomatozes formu un 2 reizes lielāks nekā klīniski slimiem pacientiem. Pacientiem ar miksomatozes klīnisko formu leikocītu sabrukšanas procents visā novērošanas periodā bija ļoti augsts, sasniedzot 60-77%.

Vakcinēto trušu grupā trešajā dienā konstatēts straujš leikocītu sabrukšanas procentuālais pieaugums. Tas ir pierādījums tam, ka sausās dzīvās kultūras vakcīna pret trušu miksomatozi no B-82 celma izraisa asins leikocītu (kas ir atbildīgi par imunitāti) sensibilizācijas stāvokli, līdz organismā veidojas specifiskas antivielas.

Leikocītu līze veseliem trušiem visā eksperimenta laikā nepārsniedza 10%, t.i. bija normas robežās.

RSLL pētījums ļauj diagnosticēt miksomatozes asimptomātisku gaitu.

PRETENZIJA

1. Metode miksomatozes diagnosticēšanai trušiem, kas raksturīga ar to, ka tiek veikta specifiska leikocītu līzes reakcija (SLLR), izmantojot pretmiksomatozes vakcīnu no celma B-82, tiek aprēķināts RSLR indekss un tiek diagnosticēta miksomatoze, ja tās vērtība ir 10. % vai vairāk.

2. Paņēmiens miksomatozes diagnosticēšanai trušiem saskaņā ar 1. punktu, kas raksturīgs ar to, ka leikocitozes gadījumā asins paraugus pirms leikocītu skaitīšanas atšķaida ar fizioloģisko šķīdumu attiecībā 1:1 vai 1:2.

Dubova B.L., Poļakova O.N. GNU SKZNIVI, Novočerkasska

Tuberkuloze rada milzīgus ekonomiskos zaudējumus un rada lielus draudus sabiedrības veselībai. Primārais uzdevums prettuberkulozes pasākumos ir savlaicīga diagnostika, agrīna infekcijas izraisītāja avota noteikšana.

Intravitālā diagnostika ar alerģijas testiem ir novēlota un nenosaka dzīvniekus pirmajās dienās un pat mēnešos pēc inficēšanās. Tāpēc ir vajadzīgas jutīgākas metodes, kas var noteikt etioloģiju alerģisks process par tuberkulozi.

Lai diferencētu nespecifiskas tuberkulīna reakcijas, tiek izmantots vienlaicīgs tests ar alergēniem - PPD zīdītājiem un CAM, kas izgatavots no vairākiem netipisku mikobaktēriju celmiem. Vienlaicīgu alerģijas testu izmanto tuberkulīna sākotnējai diagnostikai veselās saimniecībās un gadījumos, kad reakcijas uz tuberkulīnu izraisa netipiskas mikobaktērijas un skābi izturīgi saprofīti. Viņi arī izmanto kontroles un diagnostikas nokaušanu dzīvniekiem, kuriem ir reakcija uz intradermālu tuberkulīna injekciju, lai noskaidrotu diagnozi ar patoloģiskiem un bakterioloģiskiem pētījumiem un biotestiem.

Tomēr augstražīgo govju īpašnieki apstrīd dzīvnieku kontroles un diagnostiskās kaušanas likumību, kas devusi pozitīvu reakciju tuberkulīna tests, un nepieciešamas intravitālas diagnostikas metodes augsti produktīvu dzīvnieku papildu testēšanai attiecībā uz tuberkulozi. Tāpēc papildus vienlaicīgi alerģijas tests, patoloģiskie izmeklējumi un laboratorijas pētījumi, saimniecību epizootoloģiskā apsekošana, alerģisko reakciju dinamikas analīze in dažādas grupas dzīvniekiem, lai pētītu nespecifiskas tuberkulīna reakcijas liellopiem un atšķirtu tās no specifiskajām, tiek izmantotas šūnu reakcijas in vitro - limfocītu blastu transformācijas un leikocītu specifiskās līzes reakcija un citas reakcijas.

Mūsu pētījumā, lai identificētu nespecifisku tuberkulīna reakciju cēloņus, mēs izmantojām specifisku leikocītu līzes reakciju salīdzinājumā ar patoloģiskām izmaiņām.

RSLL tika veikta, kā modificēja B.L. Dubovojs.

Pētījuma mērķis bija identificēt nespecifisku reakciju cēloņus, kas saistīti ar dažāda veida mikobaktēriju izraisītas tuberkulozes diferenciāldiagnozi, kam ir liela veterinārā, sanitārā, epizootiskā un ekonomiskā nozīme.

Ar mikobaktērijām inficētu dzīvnieku un tuberkulozes pacientu noteikšana pēc specifiskas leikocītu līzes (SLLR) reakcijas in vitro ir balstīta uz fenomenu, kas uzreiz parādās paaugstinātas leikocītu jutības pret atkārtotu saskari ar antigēnu (alergēnu) ārpus organisma.

Ražošanas apstākļos, pārbaudot RSLL par iespējamā diagnoze tuberkuloze tika veikta Rostovas apgabala pamatsaimniecībās. Tātad iepriekš plaukstošā fermā astoņas govis reaģēja uz tuberkulīnu. Viņi tika pakļauti kontroles un diagnostikas nokaušanai. Veterinārās un sanitārās izmeklēšanas laikā iekšējo orgānu patoloģiskās izmaiņas un limfmezgli nav vizuāli atklāts. Patoloģiskā materiāla bakterioloģiskie pētījumi Rostovas reģionālajā laboratorijā bija negatīvi.

Pirms kaušanas no govīm tika ņemtas asinis, lai veiktu specifisku leikocītu līzes reakciju (SLLR). Pētījumu rezultāti par leikocītu skaitu un RSLL rādītājiem asins paraugos ir parādīti tabulā.

Tabula. Leikocītu skaits, ROLL rādītāji un patoloģiskās izmaiņas govīm, kas reaģēja uz tuberkulīnu.

Kā redzams tabulā, visos asins paraugos ar PPD-tuberkulīnu zīdītājiem specifiskās leikocītu līzes reakcija bija negatīva, kas liecina par M. bovis infekcijas neesamību.

Asins paraugos no četrām nokautām govīm specifiskā leikocītu līzes reakcija bija pozitīva ar PPD-tuberkulīnu putniem. Paraugos leikocītu līze bija 11%, 20%, 22%, 26%, kas liecina par dzīvnieku inficēšanos ar M. avium.

Četru dzīvnieku asins paraugos tika iegūts pozitīvs RSLL rezultāts ar CAM. Leikocītu līzes procentuālais daudzums bija 11%, 13%, 15%, 20%, kas saistīts ar dzīvnieku inficēšanos dzīves laikā ar netipiskām mikobaktērijām.

Tādējādi asins analīzes, kas veiktas ar tuberkulīnu ārpus ķermeņa no dzīvniekiem, kuriem tuberkulīna tests ir pozitīvs īss laiks identificēt reāli iemesli, kas izraisīja ķermeņa sensibilizāciju pret tuberkulīnu un, pats galvenais, ļauj novērst ļoti produktīvu dzīvnieku nepamatotu kaušanu. Iespēja izmantot in vitro diagnostikas metodi nespecifiskām tuberkulīna reakcijām tieši fermas apstākļos veicinās dažāda rakstura alergēnu plašu izmantošanu kā līdzekli specifisku un nespecifisku tuberkulīna reakciju diferenciāldiagnozei.

Mēs iesakām izmantot piedāvāto metodi nespecifisku tuberkulīna reakciju diagnosticēšanai no tuberkulozes brīvās fermās. Par to no visiem dzīvniekiem, kas deva pozitīva reakcija tuberkulīna intradermālai ievadīšanai asinis tiek ņemtas un izmeklētas ārpus ķermeņa ar esošiem tuberkulīniem, kas ļauj noteikt mikobaktēriju izraisīto tuberkulīna reakciju etioloģiju dažādi veidi.

Bibliogrāfija

1. Verhovskis, O.A. Reakciju diagnostiskā vērtība šūnu imunitāte ar tuberkulozi liellopiem / O.A. Verhovskis, A.Kh. Naimanovs, O.A. Savitskaja // Reālas problēmas dzīvnieku infekcijas patoloģija un imunoloģija. Starptautiskās zinātniski praktiskās konferences materiāli Maskava, 2006.gada 16.-17.maijs. - M.; Izograf, 2006. - P.180-186.
2. Dubovojs, B.L. Jauns iekšā diferenciāldiagnoze lauksaimniecības dzīvnieku tuberkuloze / B.L. Dubovojs, O.N. Solovjova, N.V. Ulko // Zinātnisko rakstu krājums "Lauksaimniecības dzīvnieku infekcijas slimību diagnostika, profilakse un ārstēšana - Persianovskis, 2000. - P.8-12."
3. Dubovojs, B.L. Pētījumi par RSLL specifiku un aktivitāti tuberkulozes diagnostikā liellopiem / B.L. Dubovojs, O.N. Poļakova // Inovatīvais agroindustriālā kompleksa attīstības ceļš - lauksaimniecības zinātnisko pētījumu maģistra virziens. - Persianovskis, 2007. - P.67-69.
4. Naimanovs, A.Kh. Alerģisko reakciju diferencēšana pret tuberkulīnu / A.Kh. Naimanovs // Veterinārā medicīna. - 2002. - N°3.- P.10-12.
5. Norādījumi vienlaicīgas pārbaudes veikšanai, izmantojot tuberkulīnu, kompleksu alergēnu no netipiskām mikobaktērijām (AM) dzīvnieku tuberkulozes diagnostikā. Veterinārā likumdošana. T. 3, M.: "Kolos", 1981.- P.220-224
6. Dzīvnieku tuberkulozes epizootoloģiskā kontrole un diagnostika dažādi veidi. Cilvēkiem un dzīvniekiem izplatīto infekcijas slimību profilakse un kontrole. Savākšana sanitārās un veterinārie noteikumi. Ed. Oficiālā. Krievijas Valsts sanitārās un epidemioloģiskās uzraudzības komiteja. Krievijas Lauksaimniecības ministrija. Maskava, 1996.- 164. - 167. lpp.

Eseja

Nepieciešamas jutīgākas metodes, kas ļauj noteikt tuberkulozes alerģiskā procesa etioloģiju. Lai noteiktu nespecifisku tuberkulīna reakciju etioloģiju plaukstošās fermās, tika izmantots PPD-tuberkulīns putniem un CAM ārpus ķermeņa ar dzīvnieku asinīm, kas reaģē uz tuberkulīnu zīdītājiem. Ir pierādīts, ka RSLL var izmantot, lai atšķirtu specifiskas un nespecifiskas reakcijas uz tuberkulīnu.

Atslēgvārdi: diagnostika, tuberkuloze, specifiska leikocītu līzes reakcija (SLLR).

UDK 619.616.002.5

NETIPISKU UN PUTNU MIKOBAKTĒRIJU IZRAISĪTO NESPECIFĪGU REAKCIJU UZ TUBERKULĪNU DIAGNOSTIKA Dubovoi B.L., Poļakova O.N. Kopsavilkums

Nepieciešamas jutīgākas metodes, kas var noteikt alerģiskā procesa etioloģiju tuberkulozes gadījumā. PPD-tuberkulīns putniem un CAM ārpus ķermeņa ar dzīvnieku asinīm, reaģējot uz tuberkulīnu zīdītājiem, tika izmantoti, lai noteiktu nespecifisku tuberkulīna reakciju etioloģiju bagātās valstīs. Ir konstatēts, ka RSLL var izmantot gan specifisku, gan nespecifisku tuberkulīna reakciju diferencēšanai.

Atslēgas vārdi: diagnostika, tuberkuloze, specifiskas leikocītu līzes reakcija (RSLL).

Par autoriem

Dubovoy Boris L. - D. Sc. veterinārmedicīnā, profesors, Krievijas Lauksaimniecības zinātņu akadēmijas Valsts zinātniskās iestādes "Ziemeļkaukāza zonālais veterinārās pētniecības institūts" lauksaimniecības dzīvnieku infekcijas slimību un mājputnu pētniecības laboratorijas vadītājs; 6/4. Veterinarnaya st., Novocherkassk, Rostovas apgabals, 394400; Tālr.89281360864.

Atbildīgā par saraksti ar redakciju: Poļakova Olga N. - Krievijas Lauksaimniecības zinātņu akadēmijas Valsts zinātniskās institūcijas "Ziemeļkaukāza zonālais veterinārās pētniecības institūts" aspirante; 28, Sadovaya st., Novocherkassk, Rostovas apgabals, 394406; Tālr.89287549422

Dubovojs Boriss Lavrentjevičs, veterināro zinātņu doktors, profesors, Krievijas Lauksaimniecības zinātņu akadēmijas Ziemeļkaukāza Zonālās pētniecības veterinārā institūta Lauksaimniecības dzīvnieku un mājputnu infekcijas slimību izpētes laboratorijas vadītājs; 394400, Rostovas apgabals, Novočerkasska, st. Veterinārārsts, 4, apt. tālr.: 89281360864.

Atbildīgs par saraksti ar redaktoriem: Poļakova Olga Nikolaevna, Krievijas Lauksaimniecības zinātņu akadēmijas Ziemeļkaukāza zonālās pētniecības veterinārā institūta maģistrantūra; 394406, Rostovas apgabals, Novočerkasska, st. Sadovaja, 28 gadi; tālr.: 89287549422.

PRASĪBAS

UZ EKSPERIMENTĀLO PĒTĪJUMU SASTĀVĪBU, LAI PAMATOJUMS MAKSIMĀLĀS PIEEJAMĀS RŪPNIECISKO ĶĪMISKO ALERĢĒNU KONCENTRĀCIJAS DARBA VIETAS UN ATMOSFĒRAS GAISĀ.

METODISKIE NORĀDĪJUMI

MU 1.1.578-96

1. Izstrādājis Krievijas Medicīnas zinātņu akadēmijas Darba medicīnas pētniecības institūts (Dueva L.L., Alekseeva O.G.), Cilvēka ekoloģijas un higiēnas pētniecības institūts vidi RAMS (Pinigin M.A., Tepikina L.A.), Krievijas Veselības un medicīnas rūpniecības ministrijas Imunoloģijas institūts (Černousovs A.D.), Krievijas Veselības un medicīnas rūpniecības ministrijas Centrālais dermatoveneroloģijas institūts (Umerov Zh.G.), Sv. Krievijas Veselības un medicīnas nozares ministrijas Darba higiēnas un arodslimību pētniecības institūts Pēterburgā (Sidorins G.I., Martinsons T.G.), Baltkrievijas Zinātniskās pētniecības sanitāri higiēniskais institūts (Ševļakovs V.V.), Harkovas Darba higiēnas un arodslimību pētniecības institūts (Vasil Nenko M.. ), Centrālā pētniecības laboratorija Latviešu Medicīnas akadēmija(Ivanova I.A.).

2. Apstiprinājis un stājies spēkā Krievijas Valsts sanitārās un epidemioloģiskās uzraudzības komitejas priekšsēdētāja pirmais vietnieks - galvenā valsts sanitārā ārsta vietnieks. Krievijas Federācija S. V. Semenovs 1996. gada 21. oktobris

3. Ieviests, lai aizstātu metodiskos ieteikumus “Pētījumu veikšana par rūpniecisko alergēnu higiēnisko regulējumu gaisā. darba zona" (1980) un papildus "Pagaidu vadlīnijām piesārņojošo vielu maksimāli pieļaujamo koncentrāciju pamatojumam atmosfēras gaiss apdzīvotas vietas" (1989).

^ 1 izmantošanas joma

Vadlīnijas ir paredzētas toksikologiem, kas nodarbojas ar kaitīgo vielu higiēnas standartu pamatošanu darba zonas gaisā un atmosfērā. Vadlīnijas ir veltītas higiēnas standartu noteikšanai rūpnieciski ķīmiskiem alergēniem darba zonas gaisā un atmosfērā. Vairāk nekā desmit gadu prakse rūpniecisko alergēnu higiēnas standartu (MAC un OSUV) pamatošanā gaisa vidē ir apstiprinājusi šī pasākuma efektivitāti alerģisko slimību attīstības novēršanā alerģijai bīstamo nozaru darbiniekiem un industriālo reģionu iedzīvotājiem. Īsta vadlīnijas izstrādāts, ņemot vērā gadu gaitā uzkrātos datus par toksikoloģiskās alergoloģijas teoriju un praksi. Tajā pašā laikā tiek nodrošināta vienota pieeja, lai pamatotu higiēnas standartus rūpniecisko ķīmisko alergēnu jomā darba zonas gaisā un atmosfērā.

Alerģijas riska novērtēšana, nosakot higiēnas standartus ķīmiskajiem savienojumiem un sarežģīti produkti pamatojoties uz tiem, ir jāveic šādos gadījumos:

Racionējot jaunus ķīmiskos savienojumus, kas pieder pie ķīmiskajām klasēm, kas nav pētīti alergoloģiskā ziņā;

Normējot ķīmiskos savienojumus un kompleksos produktus, kas pieder pie ķīmiskām klasēm, kas satur jau zināmus alergēnus vai kuriem ir ķīmiski analogi, kuriem ir sensibilizējoša iedarbība;

Ja cilvēkiem, kuriem ir saskare ar šo ķīmisko savienojumu vai produktu, ir alerģiskas sūdzības vai alerģisku bojājumu klīniskas pazīmes.

^ 2. Pētījuma izstrādes shēma

Pētījumi tiek veikti divos posmos. 1.posma mērķis ir pētāmās vielas alergēnu īpašību apzināšana, 2.posma – higiēnas standarta vērtības pamatojums (skat. diagrammu).

Pētījuma 1. posmā tiek izmantotas jūrascūciņu un peļu ekspressensibilizācijas metodes.

^ Pētījuma dizaina shēma

I posms - alergēnu īpašību noteikšana

II posms - sanitārā standarta vērtības pamatojums

A. Normalizācija pēc analoģijas

^ B. Reitingu noteikšana pēc paātrinātās un pilnās shēmas

Pētot vienkāršus ķīmiskos savienojumus, ieteicams izmantot metodi jūrascūciņu intradermālai sensibilizācijai ausu rajonā un/vai aizkavētā tipa hipersensitivitātes (turpmāk – DTH) reproducēšanai pelēm.

Jūrascūciņu kā visjutīgākās laboratorijas dzīvnieku sugas sensibilizācija pret ķīmisko alergēnu iedarbību ļauj novērtēt pētāmās vielas alergēnu aktivitāti. Šim nolūkam dzīvniekus sensibilizē, ievadot divas vielas devas ausu zonā: 50 un 200 μg/dzīvniekam. HAT pavairošana pelēm ļauj identificēt ne tikai šķīstošo, bet arī ūdenī nešķīstošo cieto un pastveida vielu ar spēcīgu vai mērenu alergēnu aktivitāti alerģiskās īpašības. Tā kā vāju alergēnu ievadīšana pelēm neizraisa skaidri definētas HAT attīstību, ja šī eksperimenta rezultāts ar pelēm ir negatīvs vai apšaubāms, jūrascūciņas papildus jāsensibilizē ar devu 200 mcg/dzīvniekam. Tajā pašā laikā, kā arī vielām ar it kā vāju alergēnu aktivitāti, nevar izslēgt vēl lielākas sensibilizējošās devas - 500 mcg/dzīvniekam - lietošanu. Pētot sarežģītus un nesacietējušus polimēru produktus, tiek veikta jūrascūciņu kombinētā sensibilizācija (auss ādā un papildus epikutāni) un/vai tiek izmantota HAT reproducēšanas metode pelēm.

Papildus šīm obligātajām I posma pētījumu metodēm atbilstošām indikācijām var izmantot arī citas dzīvnieku sensibilizācijas metodes. Tādējādi, pētot ķīmiskos savienojumus un produktus, īpaši pastveida un viskozos, kas piesārņo strādājošo ādu, ieteicams pārbaudīt kontaktalerģijas attīstības iespējamību, izmantojot atkārtotas epikutānas lietošanas metodi jūrascūciņām. Ūdenī nešķīstošiem rūpnieciskajiem putekļiem jau plkst I posms Pētījumus var izmantot balto žurku intratraheālās sensibilizācijas metodei.

Ja pētījuma pirmajā posmā pētāmās vielas alerģiskās īpašības netiek identificētas, tad tā tiek standartizēta kā viela ar vispārēju toksisku iedarbību. Ja vismaz viens no sensibilizācijas paņēmieniem atklāja pētāmās vielas alergēnās īpašības, tad jāveic otrais pētījuma posms.

Pētījuma otrajā posmā atkarībā no standartizācijas metodes (pēc analoģijas, paātrinātas vai pilnīgas shēmas) ir iekļauti šādi toksikoloģiskie un alergoloģiskie eksperimenti.

Standartizējot pēc analoģijas, tiek salīdzināta sensibilizācijas smagums un biežums dzīvniekiem, ko izraisa atsauces alergēna un pētāmās vielas ievadīšana, izmantojot pirmās pakāpes izteiktās sensibilizācijas metodes. Normējot nešķīstošus putekļus, ir iespējams izmantot arī balto žurku intratraheālo sensibilizāciju. Vienkāršiem ķīmiskiem savienojumiem atsauces alergēns ir jau standartizēta viela, kas savā ziņā ir līdzīga ķīmiskā struktūra un satur tās pašas aktīvās ķīmiskās grupas, kas ir atbildīgas par sensibilizācijas attīstību. Sarežģīta sastāva atsauces alergēns ir jau standartizēts sastāvs, pēc sastāva līdzīgs un satur vienu un to pašu sastāvdaļu, kas ir atbildīga par sensibilizācijas attīstību.

Ja nav atsauces alergēna, otrajā pētījuma posmā tiek eksperimentāli noteikta sensibilizācijas sliekšņi: ar vienu vielas ieelpošanu - Lim sens ac, ar atkārtotām inhalācijām - Lim sens ch. Vērtību salīdzinājums Lim sens ac Un Lim sens ch Ar Lim ac Un Lim ch konstatēts toksikoloģiskos eksperimentos par integrālo un specifisko iedarbību, ļauj noteikt, vai sensibilizējošā iedarbība ir ierobežojoša. Ņemot vērā šos datus, higiēnas standarta vērtība ir pamatota (sk. 6. nodaļu).

Normējot sarežģītus ķīmiskos produktus, dzīvnieki tiek sensibilizēti abos pētījuma posmos, izmantojot visu produktu; ja tiek konstatēta sensibilizācija, testēšanai izmanto visas galvenās sastāvdaļas tīrā veidā, un, ja sastāvs nav zināms, izmanto visu produktu vai ekstraktu no tā (skatīt 5.3. apakšpunktu).

^ 3. Pētījumu veikšana alergēnu īpašību noteikšanai

3.1. Jūrascūciņu intradermāla sensibilizācija

Eksperimentā izmanto jaunas jūrascūciņas, kas sver 250 - 300 g, sadalītas 2 eksperimentālajās un vienā kopējā kontroles grupā, kurā katrā ir 8 - 10 dzīvnieki. Eksperimentālo grupu dzīvnieki tiek sensibilizēti, vienu reizi ievadot auss ārējās virsmas ādā tuvāk tās pamatnei 50 (1. eksperimentālā grupa) un 200 μg uz vienu dzīvnieku (2. eksperimentālā grupa) pētāmās vielas 0,02 - 0,1 tilpumā. ml. Kā šķīdinātājus izmanto destilētu ūdeni, fizioloģisko šķīdumu, acetonu, spirtu, Tween-80, dimetilsulfoksīdu utt., Pētot eļļainus produktus, izmantojiet ūdens emulsijas, un cietinātiem polimēriem - nosūcēji (skatīt 5.3. sadaļu). Kontroles dzīvniekiem injicē tādu pašu daudzumu šķīdinātāja, emulgatora vai ekstrakcijas šķidruma.

Sensibilizācijas noteikšana (skatīt 5. sadaļu) tiek veikta pēc 8-10 dienām. Spēcīgi alergēni abās devās izraisa izteiktu sensibilizāciju jūrascūciņām: alergoloģisko testu vidējais rādītājs grupā statistiski nozīmīgi atšķiras no kontroles dzīvniekiem. Mēreni alergēni izraisa izteiktu sensibilizāciju tikai tad, ja tos ievada 200 mikrogramu devā vienam dzīvniekam, un, ievadot 50 mikrogramu devā vienam dzīvniekam - vāju, kad sensibilizācija tiek konstatēta 1/3 - 1/2 dzīvnieku, un alergoloģisko testu vidējie grupu rādītāji nedrīkst atšķirties no kontroles dzīvniekiem. Vāji alergēni izraisa vieglu sensibilizāciju tikai tad, ja viela tiek ievadīta 200 mikrogramu devā vienam dzīvniekam, un tikai asins šūnu testi var būt pozitīvi, un ādas testi var būt negatīvi.

^ 3.2. Jūrascūciņu kombinēta sensibilizācija

Sarežģīti produkti un pārbaudīti polimēri var ļoti slikti uzsūkties, un tādā gadījumā jūrascūciņām sensibilizācija nenotiek pat tad, ja auss ādā tiek ievadīts 200 mikrogrami uz dzīvu. Par galīgo lēmumu par alergēnu īpašību esamību, kad negatīvi rezultāti Dzīvnieku alergoloģiskās pārbaudes sākas nākamajā dienā ar vielas epikutānu aplikāciju. Pēc 7. lietošanas reizes jūrascūciņas pārbauda vēlreiz.

Vielas koncentrācija epikutānai lietošanai tiek izvēlēta ādas kairinošās iedarbības izpētes procesā vai īpašā eksperimentā: 6 - 8 jūrascūciņām ar svaru 250 - 300 g 7 - 10 dienas (5 reizes nedēļā) tiek ievadīti 3 pilieni. pētāmās vielas un tās atšķaidījumu 1 :2, 1:10 un 1:100 uz apgrieztiem ķermeņa sānu virsmas “logiem” ar izmēriem 2 x 2 cm Ir ērti lietot gaistošu šķīdinātāju, kas nekairina ādu (acetons, 70° spirts, dimetilsulfoksīds) kā šķīdinātājs. Ja veidojas plēvīte, to pēc 4 stundām nomazgā, citos gadījumos ādu ne ar ko neārstē; Ziedes gatavo no nešķīstošām vielām (vēlams ar lanolīnu, nevis vazelīnu), kuras ar acu lāpstiņu sadala pa “loga” virsmu. Sensibilizācijai izvēlieties maksimālo koncentrāciju, kas neizraisa kontaktdermatīta attīstību.

^ 3.3. HAT noteikšana pelēm

Katra eksperimentālā un kontroles grupa ietvēra 10 tīras līnijas peles (BALB/C, CA-1, DVA/2) vai 16-20 baltas izaudzētas peles, kas sver 18-20 g. Dzīvnieki tika sensibilizēti ar 10 mM vai 100 μg testējamo vielu vienreiz intradermāli astes pamatnē. Vielas sensibilizējošo devu emulģē 60 μl Freunda pilnīgā adjuvanta (PAF) un Henksa šķīduma pH 7,5 maisījumā, kas sagatavots attiecībā 1:1. PAF sastāvs: 1 ml lanolīna, 3 ml vazelīna eļļas, 5 mg termiski nogalinātas BCG vakcīnas. Šim PAF tilpumam pievieno 50 μl Tween-20 un 0,5 ml destilēta ūdens. Maisījumu apstrādā autoklāvā. Kontroles dzīvniekiem injicē 60 μl šī maisījuma, nepievienojot testējamo vielu.

Lai noteiktu sensibilizāciju, pēc 5 dienām peļu pakaļējās ķepas spilventiņā injicē tādu pašu daudzumu testa vielas (10 mM vai 100 μg), kas izšķīdināta (suspendēta) Henksa šķīdumā, kā sensibilizācijas laikā. Pēc 24 stundām izmantojiet inženiertehnisko mikrometru MK-0-25, lai izmērītu abu biezumu pakaļkājas mm. Par tūskas daudzumu, t.i. par HAT attīstību spriež pēc abu pakaļkāju biezuma atšķirības (HAT indikators). Kontroles dzīvniekiem tas parasti ir 0,04–0,09 mm. Statistiski nozīmīgs grupas vidējā HAT indeksa pārsniegums izmēģinājuma dzīvniekiem, salīdzinot ar kontroles dzīvniekiem, liecina par pētāmā savienojuma izteiktām vai mērenām sensibilizējošām īpašībām.

^ 3.4. Vairākas epikutānas lietošanas uz jūrascūciņām

Sensibilizējošās koncentrācijas izvēli veic tāpat kā kombinētās sensibilizācijas gadījumā (skatīt 3.2. apakšpunktu). Epikutānas aplikācijas tiek veiktas 5 reizes nedēļā 4 nedēļas (kopā 20 lietošanas reizes). Ja eksperimenta 2. - 3. nedēļā jūrascūciņām parādās kontaktdermatīta pazīmes, tad sensibilizējošās aplikācijas tiek turpinātas citā ādas vietā. Sensibilizācija tiek konstatēta 1 - 2 dienas pēc pēdējās lietošanas reizes. Šajā gadījumā pretējā pusē tiek veikta pilienu ādas pārbaude.

^ 4. Pētījumu veikšana, lai pamatotu higiēnas standartu vērtību

4.1. Balto žurku intratraheāla sensibilizācija

Divām balto žurku grupām vienu reizi trahejā ievada 0,5–1,0 ml visvairāk sasmalcinātu putekļu suspensijas 50 un 10 mg devās fizioloģiskā šķīdumā, kas uzkarsēts līdz 37 °C. Kontroles grupas dzīvniekiem injicēja 1 ml fizioloģiskā šķīduma, kas uzsildīts līdz 37 °C.

Labāk ir veikt ievadīšanas procedūru bez anestēzijas. Lai to izdarītu, žurka tiek fiksēta vertikālā stāvoklī, ievietota tajā mutes dobums metāla zondi, kas piestiprināta pie šļirces ar atbilstošu suspensijas devu, pa balsenes priekšējo sienu izvada caur balsenes (rodas obstrukcijas sajūta), līdz tā apstājas pie trahejas bifurkācijas, zondi nedaudz paceļ un ievieto. Pēc ievadīšanas dzīvnieks vairākas reizes tiek turēts vertikālā stāvoklī elpošanas kustības. Šajā gadījumā sēkšanas un svilpes skaņas apstiprina suspensijas iekļūšanu plaušās.

Visu grupu dzīvnieki tiek pārbaudīti 5 dienas pēc intratraheālās ievadīšanas.

^ 4.2. Vienreizēja ieelpošana

Vienreizējas vielas inhalācijas, lai noteiktu vērtību Lim sens ac ir vēlams veikt jūrascūciņām vai baltajām žurkām pēc vērtības noteikšanas Lim ac. Vājiem un vidēji smagiem alergēniem parasti pietiek ar pētāmās vielas ieelpošanu koncentrācijās, kas ir aktīvās vielas līmenī, sliekšņa līmenī un par kārtu zemāku par vispārējo toksisko iedarbību. Pētot spēcīgus alergēnus, ir nepieciešams veikt arī inhalācijas zemākā koncentrācijā. Katras ieelpošanas ilgums ir 4 stundas, nosakot gaisa standartus darba zonā, un 24 stundas atmosfēras gaisam. Dzīvnieku skaitam grupā jābūt vismaz 10.

Žurkām jāveic atsevišķas inhalācijas, lai varētu salīdzināt vērtības Lim sens ac Un Lim ac iegūts no vienas dzīvnieku sugas. Tomēr, ja vienreizēja ieelpošana neizraisa sensibilizāciju žurkām, tad jūrascūciņām tā ir jāatkārto.

Sensibilizācija tiek konstatēta nedēļu pēc ieelpošanas.

Aiz muguras Lim sens ac uzņemt vielas koncentrāciju, kuras vienreizēja ieelpošana izraisa sensibilizāciju 2-5 no 10 dzīvniekiem, kas izpaužas ar pozitīviem laboratorijas testiem un/vai provokatīviem testiem. Šajā gadījumā sensibilizācijas indikatoru grupas vidējās vērtības var statistiski būtiski neatšķirties no kontroles rādītājiem.

^ 4.3. Atkārtota iedarbība ieelpojot

Atkārtotas inhalācijas veic tās pašas sugas dzīvniekiem, uz kuriem tā tika noteikta Lim sens ac. Ekspozīcijas ilgums ir: kad ir noteikta maksimālā pieļaujamā koncentrācija darba zonas gaisā, 4 stundas dienā, 5 reizes nedēļā 2 nedēļas maksimāli pieļaujamajai koncentrācijai atmosfēras gaisā, 14 dienas nepārtraukti (apaļ-; pulkstenis) ekspozīcija. Attiecīgi pēc 2 nedēļām tiek veikta pirmā dzīvnieku pārbaude. Ja rezultāts ir negatīvs vai apšaubāms, inhalāciju turpina vēl 2 nedēļas tādā pašā režīmā un veic atkārtotu pārbaudi. Nosakot maksimāli pieļaujamās koncentrācijas darba zonas gaisā, kopējais iedarbības ilgums nedrīkst pārsniegt vienu mēnesi, un atmosfēras gaisam eksperimentu var turpināt līdz 2 mēnešiem. Ilgāka iedarbība nav ieteicama, jo tā nepalielina sensibilizējošo efektu. Turklāt turpmākās inhalācijas var izraisīt iedarbības pavājināšanos kompensējošo imūno procesu attīstības dēļ un ievērojami sarežģīs sliekšņa koncentrācijas noteikšanu. Tādējādi 2-4 nedēļu eksperiments pēc savas iedarbības principā ir līdzvērtīgs hroniskam toksikoloģiskajam eksperimentam, kas ļauj salīdzināt vērtības Lim ch Un Lim sens ch .

Sensibilizējošās iedarbības sliekšņa koncentrācijas noteikšana ( Lim sens ch) tiek veiktas saskaņā ar tiem pašiem principiem kā ar vienreizēju ieelpošanu.

^ 5. Sensibilizācijas noteikšanas metodes

Šajā dokumentā ir ieteiktas metodes, kā identificēt sensibilizāciju pret ķīmiskiem savienojumiem un produktiem, kas ir plaši pārbaudīti toksikoloģiskajā praksē: ādas provokatīvie testi un laboratorijas specifiskie alerģijas testi, kuru pamatā ir asins šūnu reakcija uz alergēnu in vitro. Šie testi atklāj alerģiskas reakcijas dažādi veidi: lēni (provokatīva pilēšana ādas tests), tūlītēja reagin tipa (pārbaudes ar tuklo šūnām), kā arī imūnkompleksu mediēts (leikocītu līze un asins neitrofilu testi). Ieteicamie testi nedrīkst ierobežot pētniecības iniciatīvu, jo ir likumīgi izmantot citas gan specifiskas alerģijas diagnostikas, gan nespecifiskas metodes, kas norāda uz sensibilizācijas attīstību izmēģinājuma dzīvniekiem (imunoloģiskās, bioķīmiskās, imūnmorfoloģiskās utt.).

^ 5.1. Provokatīvs ādas pilienu tests jūrascūciņām

Lai veiktu ādas pilināšanas testu (turpmāk tekstā SP), tiek veikta iepriekšēja testējamās koncentrācijas un pētāmās vielas atlase neskartu jūrascūciņu grupai (6-8 indivīdi). Lai to izdarītu, uz dzīvnieka ķermeņa sānu virsmām apmatojums tiek nogriezts 4 līdz 8 zonās, kuru izmērs ir 1 x 1 cm, atdalītas ar vilnas sloksnēm. Uzklājiet 1-3 pilienus vielas noteiktā koncentrācijā attiecīgajā zonā. Parasti vielu pārbauda tās sākotnējā formā un divkāršos vai desmitkārtīgos atšķaidījumos. Kā šķīdinātāju (šķīdinātāju) izmanto ūdeni, 70° spirtu, acetonu un dimetilsulfoksīdu. Šajā gadījumā vienai no ādas zonām jābūt kontrolei, kurai tiek uzklāts atbilstošs šķīdinātājs (šķīdinātājs). Reakciju vizuāli novērtē pēc 24 stundām.

Kā testa koncentrāciju izvēlieties maksimālo koncentrāciju, kuras uzklāšana uz veselu jūrascūciņu ādas pēc 24 stundām neizraisa kairinājuma reakciju (eritēmu, pietūkumu).

CP iestatīšana. 1 pilienu testējamās vielas testa koncentrācijā uzklāj uz jūrascūciņu sānu ādas bez apmatojuma (eksperimentālā un kontrole). Reakciju vizuāli novērtē pēc 24 stundām, izmantojot šādu skalu:

0 punkti - nav redzamas reakcijas;

1 punkts - viegla sārta eritēma visā zonā vai gar perifēriju;

2 punkti - spilgti rozā eritēma visā zonā vai gar perifēriju;

3 punkti - spilgti sarkana eritēma visā zonā;

4 punkti - ādas pietūkums ar eritēmu vai bez tās;

5 punkti - smags pietūkums, fokusa čūlas, asinsizplūdumi.

^ 5.2. Provokatīvs ausu pietūkuma tests

TOU testēšanas koncentrācijas izvēle principā neatšķiras no CP koncentrācijas: tiek izmantoti tie paši šķīdinātāji (acetons, 70° spirts) un vielas atšķaidījumi (no 0,1 līdz 20%, retāk 50% vai neatšķaidīti). produkts). Tomēr kopējais skaits dzīvnieku skaits ir palielināts, jo vienam dzīvniekam var pārbaudīt tikai divas koncentrācijas (vienu katrai ausij).

TOU iestatīšana: vispirms ar mikrometru izmēra vidējās daļas biezumu mm auss kauls, tad uz auss vidējās trešdaļas abām virsmām uzklāj 25 μl pārbaudāmās vielas darba koncentrācijā, iztaisno un fiksē ar pinceti. Pēc 24 stundām tiek atkārtoti izmērīts auss biezums un TOU indekss tiek aprēķināts no biezuma starpības pirms un pēc uzklāšanas. TOC tiek uzskatīts par pozitīvu jūrascūciņām un žurkām, ja tas ir 0,03 mm vai vairāk, pelēm - 0,01 mm vai vairāk. Jūrascūciņām TOU var skaitīt punktos šādā skalā:

0 punktu - līdz 0,03 mm;

1 punkts - 0,03 - 0,07 mm;

2 punkti - 0,08 - 0,12 mm;

3 punkti - 0,13 - 0,17 mm;

4 punkti - 0,18 - 0,22 mm;

5 punkti - 0,23 mm vai vairāk.

^ 5.3. Vielas darba devu izvēle specifisku alerģijas testu veikšanai ar dzīvnieku asins šūnām

Īpašas alerģijas pārbaudes ar asins šūnām, kā likums, tiek veiktas ar 0,1 - 0,01% šķīdumiem (fizioloģisko šķīdumu), tāpēc var izmantot slikti šķīstošas ​​vielas. Vielām, kas nešķīst ūdenī pat šādās koncentrācijās, jāizvēlas ūdenī šķīstoša viela, kurai ir grupas antigēnu noteicējs: piemēram, formaldehīdu saturošiem polimēru izstrādājumiem - formaldehīda šķīdumi; polimēru izstrādājumiem, kas satur epoksīda grupas - epihlorhidrīnu; visiem hroma savienojumiem – CrCl 3; metālam Be un tā savienojumiem - berilija sulfāts u.c. Pētot cietinātus polimērus, izmanto ekstraktu: pētāmo vielu un fizioloģisko šķīdumu attiecībā 1:1 polimerizācijas produktiem un 1:10 polikondensācijas produktiem ar inkubāciju 37 °C 3 - 5 dienas.

Šķīdumus vēlams gatavot nevis no tehniskiem produktiem, bet no ķīmiski tīrām vielām. Jo tas ir skābs vai sārmaina vide var izraisīt asins šūnu bojājumus, jums jāpārliecinās, ka darba šķīduma pH ir neitrāls vai viegli sārmains (pH 7,2 - 7,4). Ja viela veido nestabilu šķīdumu, katram eksperimentam jāsagatavo darba šķīdumi. Noturīgos šķīdumus var uzglabāt ledusskapī mēnesi, taču ir jārūpējas par to sterilitāti un, ja šķīdums kļūst duļķains vai izveidojas plēvīte, šķīdumu nevar izmantot.

Pārbaudāmo vielu darba devas (šķīdumu koncentrācijas) izvēlas, veicot testu ar neskartu dzīvnieku asinīm, izmantojot vairākus atšķaidījumus. Lai identificētu sensibilizāciju, izvēlieties maksimālo šķīduma koncentrāciju, kas neizraisa līzes palielināšanos vai citas izmaiņas asins šūnās, kas atbilst testam, salīdzinot ar kontroles paraugu, kam pievienots tikai antikoagulants.

^ 5.4. Specifiska asins leikocītu līzes reakcija

1. variants. Pirmajā mēģenē vai tabletes iedobē pievieno 0,1 ml fizioloģiskā šķīduma (kontrolparaugs), bet otrajā mēģenē, kurā iepriekš ir izšķīdināta pētāmās vielas darba deva (tests). paraugs). Pēc tam abās mēģenēs pievieno 0,1 ml testa asiņu. Reaģējošās sistēmas sajauc, kratot, un inkubē 2 stundas 37 °C temperatūrā. No katra parauga 0,02 ml asiņu pārnes attiecīgi divās mēģenēs vai tabletes iedobēs, kas satur 0,4 ml 3% šķīduma, lai iznīcinātu sarkanās asins šūnas. ūdens šķīdums etiķskābe.

Variants 2. Izmēģinājuma dzīvnieku asinis ievelk divos melangos līdz atzīmei 0,5, tad pirmajam melanžam pievieno fizioloģiskā šķīdumā sagatavotu 5% nātrija citrāta šķīdumu līdz atzīmei 1 (kontrolparaugs), otrajā ( līdz tai pašai atzīmei I) - 5% nātrija citrāta šķīdums, kurā iepriekš ir izšķīdināta pārbaudāmās vielas darba deva (pārbaudāmais paraugs). Melangeurus sakrata un inkubē 37 °C 2 stundas. Pēc tam abām melanžūrām līdz atzīmei II pievieno 3-5% etiķskābes ūdens šķīdumu, kas tonēts ar metilēnzilu.

Absolūtais leikocītu skaits tiek skaitīts asins skaitīšanas kamerā vai uz pikaskela. Lietojot melangeurus, pirms kameras iepildīšanas vispirms nolej 3-4 pilienus.

RSLL indikatoru aprēķina, izmantojot formulu:

Reakcija tiek uzskatīta par pozitīvu, ja leikocītu līzes ātrums ir 10% vai lielāks. RSLL indikators virs 20% norāda augsts līmenis dzīvnieku sensibilizācija.

Ķīmisko alergēnu darba koncentrācija nedrīkst izraisīt vairāk kā 9% neskartu dzīvnieku leikocītu līzi un visbiežāk atbilst 0,5 - 0,05% atšķaidījumiem fizioloģiskā šķīdumā; Lielāks atšķaidījums ir nepieciešams vielām, kurām ir izteikta kairinoša un līdz ar to citotoksiska iedarbība uz asins šūnām.

^ 5.5. Reakcija uz specifiskiem neitrofilu bojājumiem

Lai pārbaudītu specifisku neitrofilu bojājumu reakciju (turpmāk tekstā PPN tests), kā antikoagulantu izmanto 5% nātrija citrāta ūdens šķīdumu vai 1,5% EDTA šķīdumu (Chelaton-3), kas sagatavots fizioloģiskā šķīdumā. šķīduma pH).

Pētāmās vielas darba koncentrācija tiek sagatavota, izmantojot to pašu antikoagulantu, ko pievieno asinīm. Darba koncentrācija nedrīkst izraisīt bojājumus vairāk nekā 4% neitrofilu veseliem dzīvniekiem PPN testa 1. versijā un 7% 2. versijā.

PPN testa iestatīšana. Pirmajai silikonizētajai centrifūgas mēģenei (pārbaudāmajam paraugam) pievieno 0,1 - 0,2 ml pārbaudāmās vielas šķīduma darba koncentrācijā, bet otrajai (kontroles paraugam) pievieno tādu pašu tilpumu tikai antikoagulanta. Pēc tam abās mēģenēs pievieno vienu un to pašu izmeklējamā dzīvnieka asiņu daudzumu, pēc tam mēģenes rūpīgi sajauc un 1 stundu tur istabas temperatūrā.

1. variants. Pēc inkubācijas beigām no abām mēģenēm uz stikla priekšmetstikliņa sagatavo vidēji biezas uztriepes, kuras fiksē un nokrāso, izmantojot uztriepes krāsošanai izmantoto metodi, lai aprēķinātu leikocītu formulu. Iegremdējot, tiek saskaitīti 100 neitrofīli, ņemot vērā šūnu skaitu ar izteiktu hromatinolīzi, piknozi, kodola fragmentāciju, hiperhromatozi vai kariolīzi.

2. variants. Pēc inkubācijas beigām vēlreiz rūpīgi samaisiet un abās mēģenēs pievienojiet 0,02 ml akridīna apelsīna darba ūdens šķīduma (1:20000). Šo šķīdumu uzglabā ledusskapī ne ilgāk kā 2 nedēļas. Lai to pagatavotu, izmantojiet akridīna apelsīna joda šķīdumu atšķaidījumā 1:100, ko var uzglabāt tumšā pudelē ledusskapī vairākus mēnešus. Pēc 5 minūtēm 1 pilienu satura no katras mēģenes pārnes uz diviem stikla priekšmetstikliņiem, pārklāj ar vāku un pēc 3 - 5 minūtēm izmeklē LUMAM ar iegremdēšanu. Tiek saskaitīti 100 neitrofīli, kas ir skaidri identificēti rubīna granulu pārpilnības dēļ uz citoplazmas blāvi zaļā mirdzuma fona.

Normāli, neskarti neitrofīli ir ovālas vai apaļas formas. Bojātos neitrofīlus atpazīst pēc raksturīgiem amēboīdu izvirzījumiem (palielināta šūnu mobilitāte) un morfoloģiskām izmaiņām (nelīdzenām “šķeltām” malām ar citoplazmas retināšanas sākumu šūnas malās, citoplazmas vakuolizāciju, degranulāciju, hromatīna modeļa rupjību). kodols).

Reakcijas indeksu aprēķina, dalot ar 100 bojāto neitrofilu skaita starpību eksperimentālajos un kontroles paraugos. Indikatora vērtība 0,05 vai lielāka pirmajā variantā un 0,08 vai lielāka otrajā variantā norāda uz dzīvnieka sensibilizāciju.

^ 5.6. Specifiska degranulācijas reakcija tuklo šūnas

Pētījums tiek veikts anestēzijā vai tūlīt pēc dzīvnieka galvas nociršanas. Lai to izdarītu, ar šķērēm atveriet vēdera sienu gar viduslīniju un uzmanīgi (vēlams ar pirkstiem gumijas pirkstu galos, nevis ar pinceti) izvelciet garāko peristaltiskās zarnas cilpu (5 cm vai nedaudz garāku). Novietojiet cilpu uz stikla priekšmetstikliņa tā, lai tiktu atklāti 3 lieli apzarņa segmenti. Pēc tam no abām pusēm tiek nogriezta zarnu cilpas daļa, kuras malām jākarājas 0,5 cm pāri stikla malai. Pēc tam katram pirmās kontroles zāļu segmentam tiek uzklāts 40 μl fizioloģiskā šķīduma un 20 μl svaiga autoseruma (sagatavots pētījuma dienā no asinīm, kas ņemtas no hipoglosālās vēnas) un 20 μl testējamās vielas. koncentrāciju piemēro katram otrās eksperimentālās zāles segmentam, kas sagatavots sāls šķīdumā. Abus preparātus inkubē 5 minūtes 37 °C temperatūrā, šķidro fāzi noņem, slīpā stikla malu nosusinot ar filtrpapīru un, ja nepieciešams, apzarnu atkal rūpīgi iztaisno. Preparātus uzreiz krāso, uzpildot tos ar 1% eozīna metilēnkrāsvielas šķīdumu metilspirtā (pēc May-Grunwald) 1 - 1,5 minūtes. Krāsu noņem, nedaudz sašķiebto preparātu mazgājot ar ūdeni no pipetes un atstājot pilnībā nožūt gaisā (parasti 24 stundas). Izmantojot žāvētu paraugu, ar skalpeli tiek noņemta visa zarnas daļa un starpsiena starp mezentērijas sektoriem.

Preparātus mikroskopē ar iegremdēšanu (palielinājums 10 x 80), pa diagonāli saskaita 50 tuklo šūnas, ņemot vērā starp tām bojātās formas. Par bojātām jāuzskata tuklo šūnas ar bojātu membrānu un granulu izdalīšanos ārpus tās robežām (degranulācija), kā arī pilnībā bojātas. RDTK indikatoru aprēķina, izmantojot formulu:

Reakcija tiek uzskatīta par pozitīvu, ja rādītājs ir 1,31 vai augstāks.

Darba koncentrācijas ķīmiskās vielas RDTK visbiežāk atbilst 0,01 - 0,001% atšķaidījumiem fizioloģiskā šķīdumā, kura ietekmē kontroles dzīvniekiem DTC indikators nedrīkst pārsniegt 1,0  0,3.

^ 5.7. Netieša tuklo šūnu degranulācijas reakcija

Šis tests (turpmāk tekstā RNTDC) ir balstīts uz mērķa šūnu (balto žurku tuklo šūnu) reakciju uz eksperimentālo dzīvnieku asins serumā esošo alerģisko antivielu un pētāmās vielas (alergēna) iedarbību in vitro.

Lai iegūtu tuklo šūnu kopumu, neskartām baltajām žurkām ētera anestēzijā intraperitoneāli injicē 6–10 ml fizioloģiskā šķīduma, kas uzsildīts līdz 37 °C, sajauc ar 0,5 ml heparīna. Pēc viegla masāža vēdera siena Ar šķērēm gar vēdera viduslīniju veiciet 1,5-2,2 cm garu iegriezumu, apgrieziet liemeni ar griezto pusi uz leju un savāciet no zarnu cilpām plūstošo eksudātu heparīnā samērcētā centrifūgas mēģenē. Eksudātu centrifugē 5 minūtes. pie 1500 apgr./min supernatants tiek nosusināts un nogulsnes tiek sajauktas, lai iegūtu tuklo šūnu suspensiju.

Lai veiktu NDTC, 0,05 ml tuklo šūnu suspensijas un 0,05 ml pārbaudītā dzīvnieka seruma pievieno 2 plāksnes iedobēm vai 2 mēģenēm. Pēc tam 1. paraugam (kontrolei) pievieno 0,05 ml fizioloģiskā šķīduma, 2. (eksperimentālajam) paraugam, kurā ir izšķīdināta pētāmās vielas darba deva (0,01 - 0,001% šķīdumi, kam vajadzētu nerada spontānus bojājumus vairāk nekā 5% mērķa šūnu). Pēc tam pilienu no katra parauga uzklāj uz viena attaukota stikla priekšmetstikliņa, kas 2 stikla galos ir iepriekš nokrāsots kvadrātu veidā ar 0,3% neitrāla sarkanā spirta šķīdumu un žāvēts istabas temperatūrā. Katru pilienu pārklāj ar segstikliņu, kuras malas nosmērē ar vazelīnu, un inkubē 37 °C 15 minūtes.

Preparātus pārbauda mikroskopiski ar palielinājumu 20 x 80. Katrā preparātā tiek saskaitītas 50 tuklo šūnas. RDTC indikatora aprēķins un tā novērtējums tiek veikts kā 5.6. sadaļā, uzstādot RDTC.

^ 5.8. Sensibilizācijas noteikšanas rezultātu izvērtēšana

Veicot I stadijas pētījumus, sensibilizācijas attīstības biežums un intensitāte tiek vērtēta pēc visu izmantoto provokatīvo un specifisko alergoloģisko testu grupas vidējiem rādītājiem. Pētāmās vielas alerģiskās aktivitātes klase tiek noteikta saskaņā ar tabulu. 1: 1. klase ietver spēcīgus alergēnus, 2. klase ietver mērenus alergēnus un 3. klase ietver vājus alergēnus. Ja efekts atšķiras pēc sensibilizācijas biežuma un dažādu provokatīvu un/vai specifisku alergoloģisko testu grupas vidējo rādītāju vērtībām, vielas alergēnā aktivitāte tiek novērtēta pēc izteiktākā rādītāja.

1. tabula

^ VIELU KLASIFIKĀCIJA PĒC ALERĢĒNISKĀS AKTIVITĀTES STIPRINĀJUMA

Veicot II pētījuma posma inhalācijas eksperimentus, par efektīvo koncentrāciju tiek uzskatīta tā koncentrācija, pie kuras sensibilizācija attīstās vairāk nekā pusei dzīvnieku, un alergoloģisko izmeklējumu grupas vidējie rādītāji statistiski nozīmīgi atšķiras no kontroles dzīvniekiem. Akūtas un hroniskas sensibilizējošas iedarbības sliekšņi tiek uzskatīti par koncentrācijām, pie kurām ekspozīcijas gadījumā (attiecīgi vienreizēja vai vairākas reizes) sensibilizācija attīstās 2–5 no 10 dzīvniekiem, un grupas vidējie rādītāji būtiski neatšķiras no kontroles dzīvniekiem.

^ 6. Higiēnas standartu vērtības pamatojums

Rūpniecisko ķīmisko alergēnu sanitārā standarta vērtības pamatojums, veicot pilnīga shēma izpēte sākas ar salīdzināšanu Lim sens ch Ar Lim ch. Atkarībā no to attiecības tiek noteikta MPC pamatošanas metode un zīmes A (alergēna) klātbūtne.

Nosakot maksimāli pieļaujamās koncentrācijas darba zonas gaisā, tās vadās pēc šādiem noteikumiem.

Ja ierobežojošais kritērijs ir toksicitāte, t.i. sensibilizācijas sliekšņu vērtības ir augstākas par toksicitātes sliekšņu vērtībām, tad viela praktiski nerada bīstamību kā alergēnu, un tā ir standartizēta kā ar vispārēju toksisku iedarbību; šajā gadījumā atzīme A (alergēns) netiek ievietota.

Ja vispārējās toksiskās un sensibilizējošās iedarbības robežvērtības būtiski neatšķiras vai ir vienādas, tad viela jāuzskata par potenciāli bīstamu toksikoalerģisku bojājumu attīstībai, un tā tiek normalizēta atbilstoši tās vispārējai toksiskajai iedarbībai, ko papildina zīme A (alergēns).

Ja ierobežojošais kritērijs ir sensibilizācija, t.i. Sensibilizācijas sliekšņu vērtības ir zemākas par toksicitātes sliekšņiem, tad viela apdraud kā alerģisku slimību etioloģisku faktoru, tā tiek uzskatīta par rūpnieciski ķīmisku alergēnu un tiek standartizēta pēc sensibilizējošās iedarbības ar atzīmi A ( alergēns). Šajā gadījumā ķīmiskā alergēna drošības koeficients tiek noteikts no tabulas. 2.

2. tabula

^ AKCIJAS FAKTORI KLim sens ch IZVEIDOT MPC DARBA ZONAS GAISA

Nosakot maksimāli pieļaujamās kaitīgo vielu ar sensibilizējošu iedarbību koncentrācijas atmosfēras gaisā, ieteicami stingrāki kritēriji, ņemot vērā, ka bērni, veci cilvēki un cilvēki ar invaliditāti ir pakļauti dažādas slimības. Šajā gadījumā tiek ņemta vērā ne tikai hroniskās sensibilizējošās iedarbības sliekšņa vērtība, bet arī hroniskās sensibilizējošās iedarbības zona, kas noteikta pēc formulas:

.

Turklāt atbilstoši izmēram Z sens ch noteikt drošības koeficientu k Lim sens ch saskaņā ar tabulu 3 Iegūto sensibilizējošās iedarbības MPC vērtību salīdzina ar vispārējās toksicitātes MPC vērtību, un kā higiēnas standarts tiek izvēlēta zemākā MPC vērtība. Atzīme A (alergēns) tiek novietota saskaņā ar principiem, kas pamato maksimāli pieļaujamo koncentrāciju darba zonas gaisā.

3. tabula

^ AKCIJAS FAKTORI KLim sens ch IZVEIDOT MPC ATMOSFĒRAS GAISĀ

Tātad, ja hroniskā, toksiskā un sensibilizējošā sliekšņa vērtības sakrīt un ir 0,01 mg/m 3, tad Z sens ch būs vienāds ar 1,0. Šajā gadījumā saskaņā ar tabulu. 3, sensibilizējošās iedarbības drošības koeficients nedrīkst būt mazāks par 3,0, un MPC vērtība būs 0,003 mg/m 3. Ja toksicitātes drošības koeficients ir iestatīts uz 2,0, t.i. maksimālā pieļaujamā koncentrācijas vērtība būs 0,005 mg/m 3, ieteicama zemākā maksimāli pieļaujamā koncentrācijas vērtība, t.i. 0,003 mg/m3. Bet, ja aplūkojamajā piemērā toksicitātes drošības koeficientam jābūt vismaz 5,0, t.i. šim efektam noteiktā vērtība būs vēl mazāka (0,002 mg/m 3), tad tā tiek izvēlēta.

Pamatojot OBUV paātrināta metode, t.i. vielas sensibilizējošās iedarbības zonu aprēķina pēc vērtības, izmantojot zemāk esošo formulu, un TBEL vērtību, kas aprēķināta no vispārējās toksiskās iedarbības, samazina tik reižu, cik tā ir Z sensac .

.

Tātad, ja, aprēķinot toksicitāti, ULV vērtība ir noteikta kā 0,2 mg/m 3, un Z sens ac ir vienāds ar 4, tad pārbaudāmās vielas ULV, ņemot vērā sensibilizējošu efektu, būs 0,05 mg/m 3 (0,2:4). Marķējums A (alergēns) tiek ievietots saskaņā ar principiem, kas izmantoti MPC pamatošanai.

Standartizējot pēc analoģijas, ja vielas izraisītās sensibilizācijas biežums un intensitāte sakrīt ar biežumu un intensitāti, ko izraisa saskare ar atsauces alergēnu, MPC vai OBUV tiek iestatīts alergēna atsauces standarta vērtības līmenī, kas apzīmēts ar A (alergēns). Ja sensibilizācijas biežumā un intensitātē ir būtiskas novirzes, salīdzinot ar tām, kas rodas no atsauces alergēna ietekmes, tiek veikta II izpētes stadija un augstākminētie nosacījumi tiek izmantoti, lai pamatotu MPK vai ULV vērtību.

Bīstamības klase tiek noteikta saskaņā ar vispārpieņemtiem noteikumiem profilaktiskajā toksikoloģijā.

Eksperimentā ar dzīvniekiem noteiktā MPC vērtības klīniskā un higiēniskā drošības pārbaude tiek veikta, salīdzinot darba apstākļus un darbinieku veselības stāvokli, izmantojot vispārpieņemtas profilaktiskās toksikoloģijas metodes, kā arī pamatojoties uz epidemioloģisko un alergoloģisko izmeklēšanu. strādniekiem, tostarp selektīvas specifiskas imūnalergoloģiskās pārbaudes, lai noteiktu sensibilizācijas biežumu un smagumu pret konkrēto rūpniecisko alergēnu.

Pieteikums

(Informatīvi)

^ BIBLIOGRĀFISKĀ INFORMĀCIJA

1. Pētījumu veikšana par rūpniecisko alergēnu higiēnisko regulēšanu darba zonas gaisā. 1980.gada 23.janvāra metodiskie ieteikumi Nr.2121-80. PSRS Veselības ministrija. Rīga, 1980. gads.

2. Pagaidu vadlīnijas apdzīvoto vietu atmosfēras gaisā maksimāli pieļaujamo piesārņojošo vielu koncentrāciju pamatošanai Nr.4681-88. PSRS Veselības ministrija. M, 1989. gads.

3. Ķīmiskās etioloģijas arodalerģisku slimību laboratoriskās specifiskās diagnostikas metodes. 1979.gada 25.decembra metodiskie ieteikumi Nr.10-8/94 PSRS Veselības ministrija. M, 1980. gads.

4. Aleksejeva O.G., Dueva L.A. Alerģija pret rūpnieciskiem ķīmiskiem savienojumiem. M.: Medicīna, 1978. - 242 lpp.

5. Dueva L.A., Kogan V.Yu., Suvorovs S.V., Shterengarts R.Ya. Rūpnieciskie alergēni. M. PSRS Valsts dabas aizsardzības komitejas starptautisko projektu centrs. M., 1989. - 203 lpp.

Laba diena! Mani sauc Elvīra. Galvenā problēma ir medikamenti. Piemēram, es lietoju paracetamolu pie drudža - sākas Kvinkes tūska, pirmo reizi domāju, ka tā ir kļūda, izmēģināju pēc tam sekojošas slimības laikā bez papildus medikamentiem un provokatīviem ēdieniem (medus, avenes utt.) - rezultāts ir tāda pati tūska. Taisu alergēnu testu - rezultāts negatīvs, bet ņemu izmeklējumus uz leikocītu sabrukšanu - divas trīs reizes pārsniedz normu (20-30% vietā... līdz 10%). Un tā ar milzīgu medikamentu sarakstu, sākot ar vitamīniem, antibiotikām, pretsāpju līdzekļiem un sedatīviem līdzekļiem, cita starpā. Ja zāles tiek ievadītas, reakcijas vienmēr atšķiras no sliktas dūšas līdz samaņas zudumam un zemam asinsspiedienam 80/40. Lūdzu, paskaidrojiet, kāda ir atšķirība starp alergēnu testiem un līzi?! Esmu gandrīz izmisumā, manam dēlam ir tāda pati situācija. Mēs jau esam piedzīvojuši visu iespējamo blakus efekti, sākot ar vieglām kaites un nātreni, beidzot ar anahelaktisku šoku (paldies Prednizonam – tas vienmēr palīdz). Mēs esam ilgstoši slimojuši šādā veidā: tas pāries pats vai nonāks slimnīcā ar mūsu ierobežoto zāļu sarakstu, kas apstiprināts ar pārbaudēm. Bet tas ir tik ierobežots, ka ārsti ir neizpratnē, un viņi nevar man izskaidrot atšķirību starp šiem diviem testiem. Ja uzrakstīsi atbildi, būšu ļoti pateicīgs, vai arī saiti uz enciklopēdiju, kur var atrast atbildi. Bija pat doma pamēģināt mazākas devas nekā noteikts....

18.01.2009, 17:36

Sveiki!
Lūdzu, iesakiet risinājumu šādai situācijai. Man vienmēr ir bijušas problēmas ar zobu ārstēšanu, ne tik sen man vajadzēja izņemt vairākus zobus. Septonest lietoja sāpju mazināšanai. Pēc tā ievadīšanas spiediens paaugstinājās līdz 190 un tahikardija sākās ar ātrumu 150 sitieni/min. (mans asinsspiediens ir 110) Pēc Tavegil injekcijas mans asinsspiediens sāka normalizēties. Nākamajā dienā tika novērots aizsmakums. Ārsts uzskata, ka anestēzijas līdzekļi man ir kontrindicēti: ubestestīns, ultrakaīns, septonests.
Tā kā man joprojām ir jāārstē zobi, kas man jādara?

19.01.2009, 00:06

Vai jums jau ir veikta zobu ārstēšana ar anestēziju pirms šī incidenta? Vai šāda reakcija ir bijusi arī iepriekšējās anestēzijas injekcijās, vai šī ir pirmā reize? Interesē arī kāda anestēzija tika dota un adrenalīna koncentrācija lietotajā anestēzijas līdzeklī un slimību klātbūtne sirds un asinsvadu sistēmai
Šāda reakcija var būt saistīta ar anestēzijas līdzekļa iekļūšanu asinsvadā (ar dažiem anestēzijas veidiem pastāv iespēja iekļūt asinsvadā). Arī šādi simptomi var būt reakcija uz adrenalīnu, kas ir daļa no anestēzijas līdzekļa.
Mūsu uzņēmumā pacienti ar lokālo anestēzijas līdzekļu nepanesību tiek nosūtīti uz slimnīcas ķirurģiskās zobārstniecības nodaļu, kur tiek izmeklēti un ārstēti š.g. vietējā anestēzija vai anestēzijā.

19.01.2009, 09:51

Paldies par ātro atbildi! Pirms tam lidokaīnu lietoja nelielu iejaukšanos laikā, izmantojot to, es nesen noņēmu dzimumzīmi uz sejas. Viņa to labi panesa, bet deva, acīmredzot, bija maza.
Septonest tika lietots divas reizes, otro es jums aprakstīju un pirmo arī zobārstniecībā, pēc tam man asinsspiediens paaugstinājās līdz 140 un 5-6 stundas es nevarēju apturēt asiņošanu no zoba.
Starp sirds un asinsvadu slimībām ir ekstrasistoliskā aritmija.
Ārsts man uzrakstīja kontrindikācijas: ubestezīna šķīdums 4 u, ultrakaīna šķīdums 2 u, septonest šķīdums. Diemžēl nevaru atbildēt par adrenalīna koncentrāciju.

18.02.2009, 18:33

Sveiki,
Es veicu imunoloģisko testu anestēzijas līdzekļiem, un rezultāti ir šādi:

1. Ultracaine D-S — 81 (11%)
2. Ultrakaīns D-S forte - 61 (32%)
3. Anrenalīns - 64 (29%)
4. Lidokaīns - 58 (36%)
5. Scandonest - 76 (16%)
6. Ubestezin forte - 58 (36%)
7. Septanest ar andrenalīnu - 65 (28%)
Pēc aktivitātes pakāpes:

Izrādās, ka šīs zāles nevar lietot (visas >10%) anestēzijas laikā zobārstniecībā. Tātad, ko jūs varat darīt tagad?

18.02.2009, 21:12

Es sniegšu jums mājienu par analīzes vērtību:

"Īpašā leikocitolīzes reakcija uzrādīja leikocītu skaita izmaiņas salīdzinājumā ar kontroli 91 (100%) ar šādām zālēm:
...
4. Lidokaīns - 58 (36%)
...
līze līdz 11% - vāji pozitīva
līze līdz 21%-40% - vidēji pozitīva
līze līdz 41%-100% - krasi pozitīva

Pirms tam lidokaīnu izmantoja nelielu iejaukšanos laikā, izmantojot to, es nesen noņēmu dzimumzīmi uz sejas. Labi panesa