Preparater basert på monoklonale antistoffer. Antistoffmedisiner Bivirkninger av monoklonale antistoffer

Klassifisering av legemidler som inneholder antistoffer

Helbredende serum.

Immunoglobuliner.

Gamma globuliner.

Plasma preparater.

Det er to kilder for å få spesifikke mysepreparater:

hyperimmunisering av dyr (heterologe serumpreparater);

givervaksinasjon (homologe legemidler).

2.1. Heterologe serumpreparater.

Store dyr, hester, brukes hovedsakelig til produksjon av heterologe serumpreparater. Hester har høy immunologisk reaktivitet, og på relativt kort tid er det mulig å få serum som inneholder antistoffer med høy titer fra dem. I tillegg gir introduksjonen av hesteprotein til mennesker minste mengde bivirkninger. Dyr av andre arter brukes sjelden. Dyr som er egnet for bruk i en alder av 3 år og oppover er gjenstand for hyperimmunisering, dvs. prosessen med gjentatt administrering av økende doser antigen for å akkumulere den maksimale mengden antistoffer i blodet til dyr og opprettholde det på et tilstrekkelig nivå så lenge som mulig. I løpet av perioden med maksimal økning i titeren av spesifikke antistoffer i blodet til dyr, utføres 2-3 bloduttak med et intervall på 2 dager. Blod tas med en hastighet på 1 liter per 50 kg hestevekt fra halsvenen til en steril flaske som inneholder et antikoagulant. Blodet hentet fra produserende hester overføres til laboratoriet for videre bearbeiding. Plasmaet skilles fra de dannede elementene i separatorer og defibrineres med en løsning av kalsiumklorid. Bruken av heterologt helserum er ledsaget av allergiske reaksjoner i form av serumsyke og anafylaksi. En måte å redusere bivirkninger av serummedisiner, samt øke deres effektivitet, er å rense og konsentrere dem. Myse er renset fra albuminer og noen globuliner, som ikke er immunologisk aktive fraksjoner av myseproteiner. Pseudoglobuliner med elektroforetisk mobilitet mellom gamma- og beta-globuliner er immunologisk aktive antitoksiske antistoffer. Immunologisk aktive fraksjoner inkluderer også gammaglobuliner. Denne fraksjonen inkluderer antibakterielle og antivirale antistoffer. Rensing av serum fra ballastproteiner utføres ved bruk av Diaferm-3-metoden. Ved bruk av denne metoden renses mysen ved utfelling under påvirkning av ammoniumsulfat og ved peptisk fordøyelse I tillegg til Diaferm 3-metoden er det utviklet andre (Ultraferm, Alcoholferm, immunosorpsjon osv.) som har begrenset bruk.

Antitoksininnholdet i antitoksiske sera er uttrykt i internasjonale enheter (IE) vedtatt av WHO. For eksempel tilsvarer 1 IE stivkrampeserum minimumsmengden som nøytraliserer minimum 1000 dødelige doser(DLm) av tetanustoksin for et marsvin som veier 350 g 1 ME av anti-botulinum antitoksin er den minste mengden av serum som nøytraliserer 10 000 DLm av botulinum toksin for mus som veier 20 g minimumsmengde som nøytraliserer 100 DLm difteritoksin for et marsvin som veier 250 g.

I immunglobulinpreparater er IgG hovedkomponenten (opptil 97%). lgA, IgM, IgD er inkludert i legemidlet i svært små mengder. Immunoglobulin (IgG) preparater beriket med IgM og IgA produseres også. Aktiviteten til immunglobulinmedisinen uttrykkes i titeren av spesifikke antistoffer, bestemt av en av de serologiske reaksjonene og er angitt i bruksanvisningen for legemidlet.

Heterologe serumpreparater brukes til behandling og forebygging av infeksjonssykdommer forårsaket av bakterier, deres toksiner og virus. Tidlig tidlig bruk av serum kan forhindre utviklingen av sykdommen, inkubasjonsperioden forlenges, den nye sykdommen har et mildere forløp, og dødeligheten reduseres.

En betydelig ulempe ved bruk av heterologe mysepreparater er forekomsten av sensibilisering av kroppen for et fremmed protein. Som forskere indikerer, er mer enn 10 % av befolkningen i Russland sensibilisert for hesteserumglobuliner. I denne forbindelse kan gjentatt administrering av heterologe serummedisiner være ledsaget av komplikasjoner i form av forskjellige allergiske reaksjoner, hvorav den farligste er anafylaktisk sjokk. For å identifisere pasientens følsomhet for hesteprotein, utføres en intradermal test med hesteserum fortynnet 1:100, som er spesielt forberedt for dette formålet. Før behandlingsserumet administreres, injiseres 0,1 ml fortynnet hesteserum intradermalt i pasienten på bøyeoverflaten av underarmen og reaksjonen observeres i 20 minutter.

2.2. Homologe serumpreparater fra donorblod.

Homologe serumpreparater er oppnådd fra blod fra donorer som er spesielt immunisert mot et spesifikt patogen eller dets toksiner. Når slike legemidler introduseres i menneskekroppen, sirkulerer antistoffer i kroppen litt lenger, noe som gir passiv immunitet eller helbredende effekt innen 4-5 uker. For tiden brukes normale og spesifikke donorimmunoglobuliner og donorplasma. Isolering av immunologisk aktive fraksjoner fra donorsera utføres ved bruk av alkoholutfellingsmetoden.

Homologe immunglobuliner er praktisk talt areaktogene, derfor forekommer anafylaktiske reaksjoner med gjentatt administrering av homologe serummedisiner sjelden.

2.3. Preparater for bakteriell terapi (eubiotika).

Preparater for bakteriell terapi inneholder levende, antagonistisk aktive stammer av bakterier - representanter for normal mikroflora. Eksempler på slike medikamenter er lactobacterin, bifidumbacterin, colibacterin, bificol, bactisubtil, etc. Mikroorganismene i slike legemidler har antagonistiske egenskaper mot ulike mikroorganismer, først og fremst patogene tarmmikrober. Slike preparater oppnås ved å dyrke de tilsvarende mikroorganismene eller deres sporer i flytende næringsmedium, etterfulgt av tørking under vakuum fra frossen tilstand. Legemidlene brukes til å behandle dysbiose.

2.4. Preparater av terapeutiske bakteriofager.

Bakteriofager er virus av bakterier. De trenger inn i bakteriecellen, formerer seg i den og lyserer den. Dette er grunnlaget for deres bruk i behandling og forebygging av infeksjonssykdommer. Virkningen av bakteriofager er strengt spesifikk og manifesterer seg i forhold til visse arter og typer patogen.

For å oppnå bakteriofagpreparater brukes industrielle fagstammer og tilsvarende bakteriekulturer. En bakteriekultur dyrket i reaktorer med et flytende næringsmedium er infisert med en fagmestersuspensjon. Under reproduksjon lyserer fager bakterier og frigjøres i næringsmediet. Denne sammensetningen kalles fagolysat. Næringsmediet føres gjennom bakteriefiltre for å fjerne restene av bakterieceller (fagolysatfiltrat). Filtratet med bakteriofager blir bevart og overvåket for sterilitet, ufarlighet og aktivitet. Det ferdige produktet er en klar væske gul farge, pakket i flasker. Sammen med flytende produseres tørre tabletterte fager med et syrefast belegg og stikkpiller med fager.

Fager brukes til terapeutiske og profylaktiske formål. I vårt land produseres preparater av salmonellose, dysenteri, koliproteus, stafylokokker, pyofager, etc. Avhengig av sykdommen brukes fager lokalt i form av vanning, skylling, lotioner, tampong, for innføring i sårhulen. abdominale, pleurale, etc. hulrom, oralt, så vel som subkutant, intradermalt og intramuskulært .

2.5 Cytokinpreparater.

Cytokiner er stoffer som produseres av ulike celler i kroppen og har en uspesifikk immunstimulerende effekt. Cytokiner er svært mange og mangfoldige, de er forskjellige i deres virkningsmekanismer, mens de normaliserer humorale og cellulære faktorer med uspesifikk motstand og påvirkning ulike stadier og koblinger av immunitet. Cytokiner kan brukes som adjuvanser i vaksiner og kan brukes som frittstående legemidler.

Passiv immunitet– stimulert kunstige metoder, og utvikler seg også naturlig gjennom en metode som overføring av antistoffer. Kjære venner, jeg foreslår at du leser om måter å bekjempe infeksjoner og hvorfor passiv immunitet er viktig i denne artikkelen.

Former for immunitet

Passiv immunitet dannes kunstig når terapeutiske serum introduseres i kroppen. I dette tilfellet aktiveres ikke ditt eget forsvar antistoffer mot antigener i aktiv form.

Ervervet immunitet inkluderer typer immunforsvar dannet i kroppen under blodoverføring.

Passiv immunisering lar deg oppnå raske resultater, men effekten oppnås kl en kort tid, og her aktiv visning immunforsvaret oppstår på langsiktig. De injiserte antistoffene brukes til å behandle autoimmune sykdommer, onkologi, alvorlige bakterielle infeksjoner, når en persons eget forsvar ikke fungerer.

Kunstig immunitet begynner å virke umiddelbart etter introduksjonen av immunfaktorer, og handlingen slutter etter at de introduserte antistoffene eller cellulære, humorale faktorer er ødelagt. Denne prosessen kan ta 3 uker eller til og med flere måneder.

Eksempler på immunitet som oppstår ved bruk av ferdige antistoffer er bruk av humane interferonpreparater. For beskyttelse foreskrives pasienter Altevir, Laferobion. På lignende måte blir behandlet for viral hepatitt, melanomer, lymfomer. Gamunex, Phlebogamma administreres for å styrke immunforsvaret under influensaepidemier.

Serum med barrierefaktorer brukes til forgiftning med sterk giftstoffer som botulinumtoksin for å behandle alvorlige infeksjoner eller redusere immunaktivitet Menneskekroppen.

Et eksempel på passiv immunisering er administrering av serum for behandling av difteri, i tilfelle forgiftning sterke giftstoffer, slangebitt eller edderkoppbitt. Serum for å skape midlertidig passiv immunitet administreres ved mistanke om rabies eller cytomegalovirusinfeksjon.

Passiv immunitet, selvfølgelig, fører ikke til opprettelsen av en stabil livslang barriere mot infeksjoner. Imidlertid oppfyller ferdige antistoffer sin oppgave med å nøytralisere infeksjonen.

Naturlig form

Placental immunitet refererer til immuniteten hos nyfødte, som de fikk under intrauterin utvikling. Fra fødselen er babyens liv til 6-8 måneder beskyttet av antistoffer som overføres gjennom morsmelk.

En persons egen immunbarriere begynner å dannes under intrauterin utvikling. Begynnelsen av de cellulære/humorale typene av immunitet til barnet legges ved 4. uke av svangerskapet, deretter gjennom hele svangerskapet er det en gradvis dannelse av alle faktorer for selvbeskyttelse.

Form av placenta

Passiv beskyttelse av fosteret skjer gjennom placentabarrieren. Fra mors kropp får barnet IgG, samt antistoffer mot infeksjoner som mor har hatt.

Allerede før fødselen lærer barnet, ved hjelp av faktorer mottatt fra moren, om eksistensen av:

* vannkopper;

* stafylokokktoksiner;

* difteri;

* stivkrampe.

Immunbarrieren er et veldig komplekst system som fortsetter å bli bedre etter fødselen lang tid. Modenhet immunsystemet når først ved fylte 16 år.

Ferdige immunfaktorer mottatt fra moren sørger for å bevare integriteten til barnets kropp. En kraftig barriere skapes av råmelksimmunoglobuliner. 36 timer etter fødsel produserer en kvinnes kropp økte konsentrasjoner IgA.

En økt mengde IgA de første timene tjener kraftig beskyttelse fra infeksjon:

* coli;

* streptokokker;

* pneumokokker;

* kolera vibrios;

* polio.

Behovet for slik beskyttelse skyldes det faktum at babyen med den første slurk eller luftpust introduserer utallige horder av mikrober i kroppen. Tarmen til en nyfødt begynner å bli befolket av mikroflora.

Blant de mange bakteriene og soppene som koloniserer den nyfødtes tarm, er det gunstige symbiotika, så vel som farlige patogener. På egenhånd immunmekanismer Babyen er ennå ikke i stand til å handle. Morens immunforsvarsfaktorer kommer til unnsetning.

I tarmene med deltakelsen humorale faktorer immunitet, grunnlaget for den fremtidige mikrofloraen i barnets tarm er opprettet - et spesielt samarbeid mellom menneskekroppen og mikroorganismer. Mikrofloraen er unik, den eksisterer sammen med mennesker, og deltar i metabolismen av vitaminer, proteiner og annet viktig viktige komponenter for kroppen.

Mors sekretorisk IgA nøytraliserer det meste farlige infeksjoner. De representerer den første forsvarslinjen Passiv form naturlig form immunitet. Slik reaktivitet av kroppen utvikler seg umiddelbart etter introduksjonen av infeksjon. Det beskytter babyen mens hans eget spesifikke immunforsvar blir dannet.

Immunitet hos en nyfødt

80 % av den nyfødtes beskyttelse mot ytre infeksjoner og indre forstyrrelser i celledeling kommer ved hjelp av mors:

* interferoner;

* immunoglobuliner;

* lysozym.

Reduserte mors beskyttende faktorer i morsmelk feiret etter 6 måneder fra fødselen. På dette tidspunktet er det nyfødtes immunsystem allerede i stand til å motstå infeksjon og lærer å avvise angrep. patogene bakterier på egenhånd.

Allerede fra 2 uker begynner babyen å utvikle sin egen beskyttelse nyttig materiale, og behovet for en passiv barriere mot mikrober reduseres.

Jeg vil nok en gang gjøre oppmerksom på viktigheten amming. Dette ubetinget refleks gir en forbindelse mellom mor og baby. Ved fôring overfører moren mikrofloraen til barnet og gir immunstøtte.

Passiv medfødt immunitet kalt en type immunforsvar, som er en medfødt egenskap hos hver person. Denne typen kalles også absolutt. Et eksempel på dette er manglende evne til å bli smittet med rinderpest.

En person mottar en barriere fra denne sykdommen fra fødselen, siden slik beskyttelse ble opprettet i evolusjonsprosessen, og deretter videreført i århundrer gjennom generasjoner.

Ulike metoder som kroppen bruker for å forsvare seg - aktive, passive typer immunitet, er i kontakt og avviser de kontinuerlige angrepene av virus og bakterier, som jeg foreslår at du ser videoen om.

Helse til alle!

Patogenese.

EN. Dannelse av immunkomplekser.Immunkomplekser bestående av et medikament og et antistoff binder seg uspesifikt til membranene til erytrocytter, etterfulgt av aktivering av komplement. En direkte Coombs-test med antistoffer mot komplement er vanligvis positiv, og med antistoffer mot IgG er den negativ. Antistoffer mot legemidlet kan påvises ved å inkubere pasientens serum med normale røde blodlegemer i nærvær av komplement og dette stoffet. De fleste tilfeller av medikamentindusert immunforsvar hemolytisk anemi forårsakes nettopp av denne mekanismen. Gjentatt forskrivning av stoffet selv i liten dose forårsaker akutt intravaskulær hemolyse, manifestert av hemoglobinemi, hemoglobinuri og akutt nyresvikt.

b. Dannelse av cytotoksiske antistoffer.Når stoffet bindes til røde blodlegemer, blir stoffet immunogent og stimulerer dannelsen av antistoffer, vanligvis IgG. Bare den direkte Coombs-testen med antistoffer mot immunglobuliner er positiv. Antistoffer mot stoffet bestemmes som følger. Etter at normale røde blodlegemer er inkubert med dette stoffet, blandes de med pasientens serum. I nærvær av antistoffer mot stoffet utvikles hemolyse. Et klassisk eksempel på immun hemolytisk anemi forårsaket av cytotoksiske antistoffer er anemi forårsaket av benzylpenicillin. Det forekommer sjelden og bare når stoffet er foreskrevet i høye doser(mer enn 10 millioner enheter/dag i.v.): direkte Coombs-test med antistoffer mot immunglobuliner er positiv hos ca. 3 % av pasientene, hemolyse utvikles enda sjeldnere. Benzylpenicillin forårsaker ekstravaskulær hemolyse. Utseendet til IgG mot benzylpenicillin er ikke assosiert med allergi mot penicilliner forårsaket av IgE.

V. Noen legemidler, som cefalosporiner, forårsaker aggregering av uspesifikk IgG og komplement, selv om dette sjelden er ledsaget av hemolytisk anemi. En direkte Coombs-test kan være positiv; en indirekte Coombs-test er alltid negativ.

G. Dannelse av autoantistoffer.Medisiner kan stimulere dannelsen av autoantistoffer mot Rh-systemets antigener. Dette skjer sannsynligvis på grunn av hemming av aktiviteten til T-suppressorer og spredning av kloner av B-lymfocytter som produserer de tilsvarende antistoffene. Den direkte Coombs-testen med antistoffer mot immunglobuliner er positiv. Inkubasjon av pasientserum med normale røde blodlegemer i fravær av medikament resulterer i absorpsjon av IgG på de røde blodcellene. Syntesen av autoantistoffer mot røde blodlegemer er forårsaket av metyldopa, levodopa og mefenaminsyre. Den direkte Coombs-testen er positiv hos omtrent 15 % av pasientene som tar metyldopa, men hemolytisk anemi utvikler seg hos mindre enn 1 % av pasientene. Effekten av metyldopa på dannelsen av autoantistoffer mot røde blodlegemer ser ut til å være doseavhengig. Anemi utvikler seg gradvis, over flere måneder med narkotikabruk, og er forårsaket av ekstravaskulær hemolyse.

2. Behandling.Først og mest viktig stadium Behandling av legemiddelindusert immun hemolytisk anemi - tilbaketrekking av stoffet som forårsaket det. Med hemolyse forårsaket av immunkomplekser skjer utvinning raskt. I alvorlige tilfeller akutt nyresvikt observeres. Ved hemolyse forårsaket av autoantistoffer er utvinningen langsommere (vanligvis flere uker). Coombs-testen kan forbli positiv i 1-2 år.

Immunbiologiske preparater

for diagnose, forebygging og

behandling av infeksjonssykdommer

Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L.A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., Prokopyev V. .IN.

Signert for trykk offsetpapir. Opplag: 500 eksemplarer.

Trykket i trykkeriet: :;

State Educational Institution of Higher Professional Education Altai State Medical University of Federal Agency for Health and Social Development.

Immunbiologiske preparater

for diagnose, forebygging og

behandling av infeksjonssykdommer

En lærebok for egenforberedelse av elever til praktiske klasser i mikrobiologi

Barnaul, 2011

Anmeldere:

Læreboken skisserer teoretiske problemstillinger knyttet til naturen og bruken av immunbiologiske preparater - diagnostiske, terapeutiske og profylaktiske: vaksiner, serum, bakteriofager, etc.

Studenter ved medisinske fakulteter (medisinsk, pediatrisk, tannlege) trenger en mer dyptgående studie av virkningsmekanismene til bakteriologiske legemidler, respons kroppen til administrering av vaksine og serummedisiner, komplikasjoner som oppstår ved bruk av visse legemidler.

Immunbiologiske preparater for diagnostisering, forebygging og behandling av infeksjonssykdommer: Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L. .EN., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V. - Barnaul, 2002. - 46 s.

A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., 2002

I forebygging, diagnostisering og behandling av infeksjonssykdommer er immunbiologiske preparater mye brukt, laget av levende og drepte mikroorganismer (bakterier, rickettsia, virus), deres metabolske produkter (toksiner), samt individuelle mikrobielle celleantigener ekstrahert fra ulike metoder. Serum og spesifikke gammaglobuliner og immunglobuliner brukes også til terapeutiske og diagnostiske formål. I tillegg er bakteriofagpreparater mye brukt til diagnostiske og terapeutiske formål.

Informasjon om sammensetningen, preparatet og virkningsmekanismen til immunbiologiske legemidler er nødvendig for legen i hans praktiske aktiviteter. Samtidig har ikke utøvere alltid mulighet til å gjøre seg kjent med nyopprettede vaksine- og serumpreparater og funksjonene ved bruken av dem. I tillegg reflekterer ikke moderne lærebøker problemstillinger knyttet til forberedelse, virkningsmekanisme og bruk av immunbiologiske legemidler fullt ut.

Alt det ovennevnte førte til behovet for å lage en lærebok som inneholder informasjon om immunbiologiske legemidler. Denne håndboken inneholder informasjon om mottak, virkestoff, bruk av immunbiologiske legemidler og komplikasjoner som oppstår ved bruk av noen av dem. Håndboken er ment å forberede tredjeårsstudenter ved medisinske, pediatriske, odontologiske og forebyggende medisinske fakulteter for praktiske timer i privat mikrobiologi.

Klassifisering av immunbiologiske preparater

I.Diagnostiske legemidler.

Preparater som inneholder antigener - diagnostiske midler, allergener, giftstoffer.

Preparater som inneholder antistoffer - diagnostiske sera.

Diagnostiske bakteriofager.

II. Terapeutiske og profylaktiske legemidler.

Preparater som inneholder antigener - vaksiner.

Preparater som inneholder antistoffer - helbredende serum og gammaglobuliner og immunglobuliner.

Bakteriofager.

Antagonistmikrober.

Interferoner og andre cytokiner.

Seksjon I

Diagnostiske legemidler

Diagnostiske medisiner brukes i laboratoriediagnostikken av en rekke sykdommer, en nøyaktig diagnose som bare kan gjøres ved hjelp av bakteriologiske og virologiske studier. I tillegg er diagnostiske medisiner nødvendige når man bekrefter ved laboratoriemetoder diagnosen av en sykdom som har et atypisk forløp eller en sykdom preget av polymorfisme av symptomer. I tillegg må diagnosen av sykdommer som ikke finnes i et gitt område og på et gitt tidspunkt bekreftes med laboratoriemetoder.

Mikrobiologiske diagnostiske teknikker er mye brukt i diagnostisering av infeksjonssykdommer. I dette tilfellet brukes bakteriologiske, virologiske, serologiske, allergiske, immunologiske diagnostiske metoder, samt molekylær hybridisering og PCR-metoder. For hver av disse metodene kreves visse diagnostiske immunbiologiske preparater: diagnostiske midler, diagnostiske sera (art, type, kompleks, adsorbert, etc.), komplement, allergener, bakteriofager, systemer for RIF og ELISA, nukleinsyreprober.

Klassifisering av diagnostiske legemidler

1. Preparater som inneholder antistoffer - diagnostiske sera:

agglutinerende;

utfelling;

antitoksisk;

hemolytisk;

antiviral;

selvlysende;

antiglobulin.

2. Preparater som inneholder antigener:

2.1) diagnostikk:

2.1.1.bakteriell;

2.1.2.erytrocytt;

2.1.3.viral;

2.2.) giftstoffer;

2.3.) allergener.

3. Diagnostiske bakteriofager.

1. Diagnostiske sera

De er mye brukt i diagnostisering av infeksjonssykdommer. immunreaksjoner for å identifisere mikroorganismer (bakterier og virus) eller giftstoffer. For å utføre slike reaksjoner kreves spesifikke diagnostiske sera.

1.1. Agglutinerende serum.

Agglutinerende sera oppnås ved å immunisere kaniner med en suspensjon av drepte mikroorganismer eller deres antigener, etterfulgt av å ta blodet og tilberede serumet. Agglutinerende sera brukes til å identifisere mikroorganismer i en agglutinasjonsreaksjon. Ulempen med slike sera er at de er i stand til å gi gruppeagglutinasjonsreaksjoner, pga de inneholder antistoffer mot bakterier som har felles antigener. Derfor brukes i dag de fleste serum adsorbert, Adsorberte sera inneholder kun typiske eller spesifikke antistoffer som tilsvarer en spesifikk type eller type antigen. For å få slike serum brukes Castellani-metoden - adsorpsjonsmetoden. Denne metoden består i å tappe serum for gruppeagglutininer ved å mette det med beslektede heterogene bakterier. I dette tilfellet oppstår adsorpsjon av gruppeantistoffer, og spesifikke antistoffer forblir i serumet. På denne måten er det mulig å få monoreseptorsera - sera som inneholder antistoffer mot kun ett antigen, og polyvalente sera som gir agglutinasjonsreaksjoner med to eller tre beslektede bakterier som har et felles antigen. Titeren til et agglutinerende serum er dets høyeste fortynning det er en reaksjon agglutinasjon.

Agglutinerende sera er mye brukt, for eksempel ved diagnostisering av sykdommer forårsaket av Escherichia, Salmonella og andre medlemmer av Enterobacteriaceae-familien.

1.2. Utfellende serum.

Utfellende sera oppnås ved å immunisere kaniner med bakterielle antigener, deres ekstrakter og toksiner. Titeren til det utfellende serumet er den maksimale fortynningen av antigenet ved hvilken utfellingsreaksjonen finner sted. Utfellende serum produseres med en høy titer - ikke mindre enn 1:100 000. Dette skyldes det faktum at antigenet bestemt i utfellingsreaksjonen har en finspredt struktur og et enhetsvolum kan inneholde flere antistoffer enn samme volum av serum - antistoffer.

Spesifikke utfellende sera brukes til diagnostisering av infeksjonssykdommer ( miltbrann, pest, tularemi, difteri, etc.), i rettsmedisinsk undersøkelse for å bestemme proteinarten, i sanitærpraksis for å oppdage samsvar med proteinstoffer i produkter (hvis det er mistanke om forfalskning).

Utfellingsreaksjonen kan utføres som en ringutfellingsreaksjon eller en gelutfellingsreaksjon.

1.3.Hemolytiske serum.

Hemolytiske serum oppnås ved å immunisere kaniner med en suspensjon av saueerytrocytter. Serumtiteren er den maksimale fortynningen som, i nærvær av komplement, forårsaker hemolyse av 3 % av en suspensjon av røde blodceller fra sau. Hemolytiske serum brukes til titrering av komplement og ved utføring av komplementfikseringsreaksjonen i indikatorsystemet.

1.4. Antivirale serum.

Immune antivirale serum oppnås ved å immunisere forskjellige dyr avhengig av virustype. For eksempel oppnås serum mot adenovirus ved å immunisere kaniner, serum mot influensavirus oppnås ved å immunisere hvite ildere, etc.

Diagnostiske antivirale sera brukes til å bestemme type eller type virus i RTGA, RSK., RN.

1.5.Luminescerende serum. Luminescerende sera er immunsera som inneholder spesifikke antistoffer merket med fluorescerende fargestoffer. Ved fremstilling av selvlysende serum tilsettes ulike fluorokromer til globulinfraksjonen av immunserumet gjennom sterke kjemiske bindinger. Selvlysende serum brukes når du utfører RIF.

1.6. Antiglobulinserum.

Antiglobulinserum (AGS) inneholder antistoffer mot immunglobuliner fra menneske- eller kaninserum, avhengig av hvilket immunserum som brukes i reaksjonen. AGS oppnås ved å immunisere dyr med immunoglobuliner fra mennesker eller kaniner. Slike sera brukes til å utføre indirekte RIF, ELISA-reaksjoner og Coombs-reaksjoner.

I dag har de blitt en nødvendig reagens i biologiske laboratorier. Salg av legemidler som inneholder monoklonale antistoffer rettet mot å behandle alvorlige sykdommer (psoriasis, kreft, leddgikt, sklerose) har en omsetning på flere milliarder dollar. Selv om det i 1975, da en artikkel ble publisert om metoden for å produsere hybridomer, trodde bare noen få på deres praktisk bruk.

Hva er monoklonale antistoffer

De er produsert immunceller, som stammer fra samme forgjenger, som tilhører den samme klonen. Dette fenomenet observeres når B-lymfocytter dyrkes i kultur. Slike antistoffer kan produseres mot nesten hvilket som helst naturlig antigen (for eksempel for å bekjempe fremmede proteiner og polysakkarider), som de spesifikt vil binde. De brukes deretter til å oppdage dette stoffet eller rense det. Monokloner er mye brukt i biokjemi, molekylærbiologi og medisin. Antistoffer er ikke lett å produsere, noe som direkte påvirker kostnadene deres.

Fremstilling av monoklonale antistoffer

Denne prosessen begynner med immunisering av dyr, vanligvis mus. For å gjøre dette introduseres et spesifikt antigen, som syntetiserer antistoffer mot det. Milten fjernes deretter fra musen og homogeniseres for å oppnå en cellesuspensjon. Den inneholder B-celler som produserer antistoffet. De blandes deretter med myelom (murint plasmacytom), som har en kontinuerlig evne til å syntetisere sin egen type i kultur (tumorkloner).

På grunn av fusjon, hybrider av svulst og normale celler(hybridomer), kontinuerlig voksende og i stand til å produsere en blanding av antistoffer med en gitt spesifisitet. Neste steg etter å ha oppnådd et hybridom - kloning og seleksjon. Omtrent 10 smeltede celler plasseres i hver brønn i en spesiell plate og dyrkes, og tester dem for produksjon av spesifikke immunglobuliner. Hybridomer fra brønner som inneholder de ønskede identiske antistoffene (paraproteiner) klones og testes på nytt. Dette gjøres 1-2 ganger.

Som et resultat oppnås celler som er i stand til å produsere sine egne immunglobuliner med kun én ønsket unik spesifisitet. Klonene kan deretter fryses og lagres. Eller dyrke, akkumulere, inokulere i mus, hvor de også vil vokse. Deretter de resulterende immunoglobulinmolekylene ulike metoder renses fra fremmede urenheter og brukes til diagnostikk i laboratorier eller terapeutisk bruk.

Det er viktig å merke seg at celleklonen oppnådd ved bruk av et hybridom er et murint immunglobulin, som, hvis det kommer inn i menneskekroppen, vil forårsake en avvisningsreaksjon. En løsning ble funnet takket være rekombinante teknologier. Ved å ta et fragment av en musemonoklon, kombinerte vi det med et fragment av humant immunglobulin. Som et resultat ble hybridomer oppnådd, kalt kimære, som allerede var nærmere mennesker, men som likevel provoserte immunreaksjoner i kroppen som skilte seg fra de som var nødvendige.

Neste steg ble tatt takket være genteknologi og er assosiert med dannelsen av såkalte humaniserte antistoffer, 90% homologe humant immunglobulin. Fra den originale hybridommusemonoklonen gjenstår bare en liten del fra fusjonen av celler som er ansvarlige for spesifikk binding. De brukes i kliniske studier.

applikasjon

Monokloner fortrenger immunsera. Hybridomer har skapt fantastiske muligheter innen analyse: de brukes som et "mikroskop" med ekstraordinære høy oppløsning. Med deres hjelp kan du oppdage unike antigener som er karakteristiske for kreftceller spesifikke vev, få monokloner med en viss spesifisitet for dem og bruke dem til diagnose og typing av neoplasmer. De brukes også i behandlingen av psoriasis, multippel sklerose, leddgikt, Crohns sykdom, brystkreft og mange andre.

For psoriasis

For behandling av psoriasis alvorlige former foreskrive systemiske glukokortikosteroider (steroidhormoner) som påvirker hormonell bakgrunn menneskelig og undertrykkende lokal immunitet. Monoklonale antistoffer mot psoriasis virker utelukkende på aktive celler av psoriasisbetennelse, uten å fullstendig undertrykke immunsystemet. Terapeutisk effekt– reduksjon av betennelsesaktivitet, normalisering av hudcelledeling og forsvinning av psoriasisplakk.

For revmatoid artritt

Monoklonale antistoffer for leddgikt har vist seg effektive i situasjoner der andre virkemidler ikke har vært effektive terapeutisk effekt. I europeiske land I dag er den viktigste terapeutiske retningen for denne sykdommen slike stoffer. Det terapeutiske kurset er langt, fordi medisinene er effektive, men sakte. På grunn av vanskeligheter med å diagnostisere leddgikt medisinsk assistanse Det er verdt å kontakte så tidlig som mulig, ved de første symptomene og mistankene.

For kreftbehandling

For et stort antall pasienter med onkologi har legemidler som inneholder monokloner blitt håpet om bedring og en retur til normalt liv. Mange mennesker med store ondartede svulster kropp, mange svulstceller og en skuffende prognose etter et behandlingsforløp, følte hun en bedring i tilstanden. Monoklonale antistoffer for kreftbehandling har åpenbare fordeler:

Ved å feste seg til ondartede celler, gjør de dem ikke bare mer synlige, men svekker dem også og forstyrrer strukturen deres. Med dem til menneskekroppen mye lettere å kjempe.
Etter å ha funnet målet deres, hjelper de til med å blokkere svulstvekstreseptorer.
Antistoffer utvikles under laboratorieforhold, hvor de bevisst kombineres med små mengder radioaktive partikler. Ved å transportere disse partiklene gjennom hele kroppen, leverer de dem direkte til svulsten, hvor de begynner å virke.

Behandlingsprinsipp

Virkningen av monokloner er enkel: de gjenkjenner visse antigener og binder seg til dem. Takket være dette merker immunsystemet raskt problemet og bekjemper det. De hjelper menneskekroppen med å takle antigener på egen hånd. En annen stor fordel er at de utelukkende virker på patologisk endrede celler, uten å skade friske.

Legemidler med monoklonale antistoffer

Selv om hybrider av normale celler og tumorceller av denne typen ble oppfunnet for ikke så lenge siden, ser utvalget av medisiner som inneholder dem allerede imponerende ut. Nye farmasøytiske produkter dukker opp jevnlig. Slike medisiner, som de fleste medisiner, har ulike bivirkninger. Ofte, etter bruk av monoklonale stoffer, mottas klager på manifestasjonen allergiske reaksjoner i form av kløe, utslett. Sjelden er terapi ledsaget av kvalme, oppkast eller tarmlidelse. Mer om effektive medikamenter mer informasjon.

Stelara

Brukes i behandling av alvorlige former for plakkpsoriasis. Legemidlet består av humane monokloner, noe som reduserer risikoen for bivirkninger til et minimum. Utgivelsesskjema – løsning for subkutan administrering i en flaske eller sprøyte. Den anbefalte dosen er 45 mg per dag. Den andre injeksjonen gis 4 uker etter den første, deretter gis injeksjoner en gang hver 12. uke. Den terapeutiske effekten av Stelar vil vises innen 15-20 dager. Vedlikeholdsbehandling sikrer varigheten av remisjon. Etter 2 injeksjoner er huden klar med 75 %.

Remicade

Det er et kimært antistoff basert på mus og humane monokloner. Legemidlet reduserer betennelse i epidermis og regulerer delingen av hudceller. Frigjøringsform – lyofilisert pulver for tilberedning parenteral løsning eller i 20 ml flasker. Sammensetningen for infusjon administreres intravenøst over 2 timer med en hastighet på opptil 2 ml per minutt. Doseringen avhenger av alvorlighetsgraden av sykdommen. Gjentatte injeksjoner gis 2 og 6 uker etter den første. For å opprettholde effekten gjentas behandlingen hver 1,5-2 måned.

Humira

Rekombinant monoklon med en peptidsekvens identisk med menneske. Legemidlet er effektivt i terapi komplekse former psoriasis, alvorlig aktiv revmatoid og psoriasisartritt. Det brukes som en subkutan injeksjon i magen eller fremre lårbensoverflate. Frigjøringsform: løsning for subkutan administrasjon. Injeksjoner på 40 mg gis en gang hver 2. uke.